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PNAS | 無需精子參與!上海交通大學魏延昌團隊用單個卵細胞培育出小鼠,能活到成年,且可以正常生育...

Retraction

在哺乳動物中,新的生命始于卵細胞和精子細胞的融合。孤雌生殖是一種僅從雌性配子中產(chǎn)生后代的方式,但由于基因組印記引起的問題而受到限制。
2022年3月7日,上海交通大學魏延昌團隊在PNAS 在線發(fā)表題為“Viable offspring derived from single unfertilized mammalian oocytes”的研究論文,該研究報告了來自單個未受精卵母細胞的活哺乳動物后代,這是通過七個印記控制區(qū)域的靶向 DNA 甲基化重寫來實現(xiàn)的。
無催化活性的 Cas9 (dCas9)-Dnmt3a 或 dCpf1-Tet1 信使 RNA (mRNA) 與靶向特定區(qū)域的單導(dǎo)向 RNA (sgRNA) 的卵母細胞共注射分別誘導(dǎo)目標區(qū)域的從頭甲基化或去甲基化。在孤雌生殖激活后,這些編輯區(qū)域在早期植入前發(fā)育過程中顯示出甲基化作為自然建立的區(qū)域的維持。將改良的孤雌胚胎移植到養(yǎng)母體內(nèi)會導(dǎo)致發(fā)育顯著延長,并最終產(chǎn)生可存活的足月后代。這些數(shù)據(jù)表明,可以通過多個關(guān)鍵印記控制區(qū)域的靶向表觀遺傳重寫來實現(xiàn)孤雌生殖。

在哺乳動物中,新的生命始于精子成功與卵細胞相遇。孤雌生殖是一種僅從未受精的卵母細胞產(chǎn)生后代的方法,由于基因組印記引起的問題,它在哺乳動物中受到限制。

盡管通過對特定印記區(qū)域的基因操作產(chǎn)生了用模擬父系基因組的非生長(ng)卵母細胞和完全生長的卵母細胞構(gòu)建的雙母小鼠, 使用來自新生小鼠的 ng 卵母細胞限制了該方法的應(yīng)用。單性生殖后代,其中個體從單個未受精的卵母細胞發(fā)育而來,尚未在哺乳動物中報道。

父系和母系基因組之間的精細協(xié)調(diào)對于哺乳動物的發(fā)育至關(guān)重要。然而,這種協(xié)調(diào)在孤雌胚胎中被破壞,因為二倍體基因組的母體特異性印記的 2 倍建立。幾個父系甲基化印記控制區(qū) (ICR),包括 H19和 Gtl2 ICR,在調(diào)節(jié)胚胎發(fā)育所必需的基因中發(fā)揮作用。

通過七個 ICR 的靶向甲基化重寫產(chǎn)生孤雌生殖小鼠(圖源自PNAS )

幾種母體甲基化的 ICR,如 Igf2r、Snrpn、Kcnq1ot1、Nespas 和 Peg10  ICR,已被證明在胎兒和/或出生后生長發(fā)育的調(diào)節(jié)中起關(guān)鍵作用。此外,一些研究已經(jīng)確定了幾個對支持雙母和雙父胚胎的足月發(fā)育至關(guān)重要的印記區(qū)域。

在這項研究中,檢查了這些區(qū)域的靶向表觀遺傳重塑是否可以改善孤雌發(fā)育。通過對七個 ICR 進行靶向甲基化編輯,該研究能夠直接從單個未受精的小鼠卵母細胞中產(chǎn)生可存活的足月后代。

參考消息:

https://www.pnas.org/doi/full/10.1073/pnas.2115248119

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