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作者：承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院  邱偉

患者李某，男，45歲，在家修繕?lè)课莶簧鞯?，?dǎo)致雙下肢活動(dòng)受限8天入院。入院據(jù)X片顯示，患者李某左右下肢多處骨折。骨科對(duì)癥消炎、鎮(zhèn)痛治療，計(jì)劃本周全麻行鋼板螺釘固定術(shù)。檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)網(wǎng)

今天進(jìn)行全套實(shí)驗(yàn)室檢查，其中術(shù)前四項(xiàng)回報(bào)，乙肝、丙肝、梅毒等相關(guān)指標(biāo)均無(wú)異常。然而他的HIV抗原抗體檢測(cè)為陽(yáng)性5.148col，HIV初篩陽(yáng)性（化學(xué)發(fā)光法）。隨后加做膠體金法，兩次均為陰性。兩種方法檢測(cè)HIV的結(jié)果不一致，遂與臨床溝通后，實(shí)驗(yàn)室再次復(fù)檢，依然是“一陰一陽(yáng)”。立即將此標(biāo)本送至疾控，疾控HIV確診實(shí)驗(yàn)回報(bào)HIV抗體陰性（-）。與患者溝通后，告知半個(gè)月之前有過(guò)婚外危險(xiǎn)性行為，決定補(bǔ)做HIV核酸檢測(cè)，結(jié)果回報(bào)HIV RNA結(jié)果為擴(kuò)增陽(yáng)性（4.12×105cop/ml）。

折騰到現(xiàn)在，醫(yī)生、患者包括我們對(duì)這一矛盾的結(jié)果都感到困惑。主要是醫(yī)生和我們?cè)撛趺春突颊呓忉屵@一結(jié)果呢？到底是感染還是沒(méi)感染呢？與感染科溝通后，建議患者半月后復(fù)檢。檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)網(wǎng)

半月后，此患者HIV的抗原抗體復(fù)合檢測(cè)為陽(yáng)性（8.45col）、HIV RNA檢測(cè)結(jié)果也為陽(yáng)性（9.85×105cop/ml）、疾控確診實(shí)驗(yàn)HIV抗體陽(yáng)性（+），最后得出結(jié)論，李某HIV感染。

通過(guò)后期思考和學(xué)習(xí)，得出造成本次“尷尬”局面的主要原因是——HIV窗口期。本案例患者由于處于感染窗口期，導(dǎo)致HIV抗體還未產(chǎn)生或者抗體較弱，但是HIV P24抗原和病毒已經(jīng)存在，初篩陽(yáng)性是因?yàn)榈谒拇鶫IV檢測(cè)試劑可以檢測(cè)到P24抗原，而不是HIV抗體，這也就導(dǎo)致WB陰性。后又復(fù)檢均陽(yáng)性，體內(nèi)已經(jīng)產(chǎn)生大量抗體和HIV病毒，所以結(jié)果相互吻合。

人體感染了HIV后，一般需要2周時(shí)間才能逐漸產(chǎn)生病毒抗體。“窗口期”是指從人體感染艾滋病毒后到外周血液中能夠檢測(cè)出病毒抗體的這段時(shí)間。一般為2周-12周。窗口期包含兩方面的意義：一是在此期機(jī)體自身是否真正針對(duì)HIV產(chǎn)生特異性的體液免疫而產(chǎn)生HIV抗體；二是如果有抗體產(chǎn)生，但所使用的抗體檢測(cè)試劑敏感度不夠，檢測(cè)不出抗體。在窗口期患者已經(jīng)被病毒感染且具有傳染性，但是我們很難發(fā)現(xiàn)。所以縮短窗口期，及早發(fā)現(xiàn)感染患者，對(duì)患者自身治療及病毒傳播的控制都十分重要。

1、HIV快速檢測(cè)

HIV快速診斷試劑主要是免疫學(xué)相關(guān)檢測(cè)法，檢測(cè)原理主要是利用特異性的抗體抗原反應(yīng)及免疫層析分析技術(shù)來(lái)定性檢測(cè)血液中是否含HIV1/2抗體。快速檢測(cè)具有操作簡(jiǎn)便，試劑反應(yīng)時(shí)間短，不需要特殊的儀器設(shè)備，對(duì)技術(shù)人員要求不高等優(yōu)點(diǎn)。其缺點(diǎn)是對(duì)早期HIV感染敏感性低，當(dāng)HIV病毒載量較高時(shí)才能檢出，增加了病原體傳播風(fēng)險(xiǎn)。

2、酶聯(lián)免疫法

從第1代試劑發(fā)展到第4代聯(lián)檢試劑，檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展已經(jīng)將HIV檢測(cè)窗口期由大約3個(gè)月縮短至幾周^[1]，并且大大提高了檢測(cè)的靈敏度和特異性。近年來(lái)，我國(guó)4代HIV試劑的質(zhì)量正穩(wěn)步提高，但和國(guó)外試劑相比，國(guó)產(chǎn)試劑在批間精密性和最低檢出量上尚存在差距^[2]。檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)網(wǎng)

3、化學(xué)發(fā)光法

近年發(fā)展的化學(xué)發(fā)光法（CLIA）靈敏度高，操作簡(jiǎn)單，無(wú)放射性污染，非常適合HIV篩查^[3]。其缺陷在于所需試劑的成本較高，假陽(yáng)性率高等問(wèn)題，對(duì)初篩陽(yáng)性者需進(jìn)一步做確證試驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證。

4、HIV確證試驗(yàn)

現(xiàn)有幾種確證試驗(yàn)可以使用，包括免疫印跡試驗(yàn)、免疫重組法及免疫熒光試驗(yàn)，我國(guó)最常用的是免疫印跡試驗(yàn)。

目前，HIV RNA代表最敏感的HIV感染篩查指標(biāo)，比基于抗原抗體的酶聯(lián)免疫檢測(cè)更敏感，可以有效縮短窗口期。有研究顯示NAT可縮短HIV感染檢測(cè)窗口期到2.93d。但核酸檢測(cè)具有以下缺點(diǎn)：

1）我國(guó)NAT檢測(cè)窗口期雖然縮短至11d，但始終存在窗口期的問(wèn)題；

2）病毒變異可能會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果；

3）對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境要求嚴(yán)格，檢測(cè)成本較高；

4）不同地區(qū)流行的HIV病毒型別有所差異，從而不同國(guó)家的檢測(cè)試劑應(yīng)該有所差異和調(diào)整。

1、電化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)法

電化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定法比酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)靈敏度更高^[4]與第4代酶聯(lián)免疫試劑類(lèi)似,可縮短HIV診斷時(shí)限^[5]。目前常見(jiàn)的是羅氏電化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)方法，檢測(cè)項(xiàng)目全、檢測(cè)準(zhǔn)確、重復(fù)性好及靈敏度高的特點(diǎn)，但試劑價(jià)格較為昂貴。

2、芯片實(shí)驗(yàn)室

這種微流控制芯片檢測(cè)技術(shù)具有高敏感度、高特異性、高通量、經(jīng)濟(jì)和快速的特點(diǎn)。既適用于大規(guī)模的血液篩查，也適用于確證病毒的感染。因此具有廣闊的應(yīng)用和發(fā)展前景。目前該技術(shù)在血篩中主要用于檢測(cè)病毒核酸樣本，還存在的缺點(diǎn)是：精密度有待改進(jìn)，樣本引入困難，定量檢測(cè)結(jié)果可重復(fù)性較低等缺點(diǎn)^[6]。檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)網(wǎng)

窗口期的長(zhǎng)短與檢測(cè)技術(shù)的靈敏度有關(guān)，檢測(cè)技術(shù)靈敏度越高,檢測(cè)出HIV的時(shí)間越早。有效選用窗口期的各種檢測(cè)技術(shù)，有助于HIV感染者的早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療，以遏制HIV的流行。提高檢測(cè)技術(shù)的靈敏度、特異性，降低檢查成本，進(jìn)一步縮短窗口期，是新一代檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展方向。隨著科技的進(jìn)步，在不久的將來(lái)，高靈敏、高特異、低成本的檢測(cè)技術(shù)將會(huì)誕生。

【參考文獻(xiàn)】