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君安醫(yī)學細胞平臺長期致力于細胞形態(tài)學檢驗的發(fā)展，為進一步推廣漿膜腔積液、腦脊液、支氣管肺泡灌洗液細胞形態(tài)學檢查，使其操作規(guī)范化、標準化，經(jīng)全國多位從事該領(lǐng)域研究的專家共同商討，根據(jù)國內(nèi)實驗室發(fā)展情況，并參考國內(nèi)外大量文獻，制定出漿膜腔積液、腦脊液、支氣管肺泡灌洗液細胞形態(tài)學檢驗與診斷技術(shù)專家共識。該共識由君安醫(yī)學細胞平臺獨家發(fā)布，不足之處，敬請指正。
腦脊液細胞形態(tài)學檢驗專家共識（2020版）
腦脊液是充滿在各腦室、蛛網(wǎng)膜下腔和脊髓中央管內(nèi)的一種無色透明體。腦脊液細胞形態(tài)學檢驗對中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病、腦膜癌病、中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病、中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤及腦血管病等疾病的診斷、鑒別診斷、療效觀察和預(yù)后評估等有重要的參考價值。為進一步推廣腦脊液細胞形態(tài)學檢驗，使其操作規(guī)范化、標準化，經(jīng)國內(nèi)多位從事該領(lǐng)域研究的君安醫(yī)學細胞平臺專家共同商討，制定出腦脊液細胞形態(tài)學檢驗專家共識。
一、具體內(nèi)容
01
檢驗?zāi)康?/span>
檢查患者腦脊液中各種細胞數(shù)量、形態(tài)和比例的變化，分析腦脊液細胞學反應(yīng)類型，結(jié)合患者臨床表現(xiàn)、影像檢查和實驗室相關(guān)檢查結(jié)果等綜合分析，做出細胞學診斷,為中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的診斷、鑒別診斷、治療效果和預(yù)后評估提供檢驗診斷依據(jù)。
02
標本采集
腦脊液標本主要通過腰椎穿刺術(shù)獲得。為避免或減少血液混入對腦脊液細胞計數(shù)及分類造成的影響，一般采用第三管腦脊液用于細胞計數(shù)及細胞形態(tài)學檢查，標本量不少于2ml為宜。推薦使用腰穿包內(nèi)帶蓋的無菌塑料試管作為采集容器，避免使用真空采血試管或痰杯等容器送檢。
03
標本送檢
原則上，腦脊液標本采集后應(yīng)立即送檢，一般不超過1h，室溫保存。如標本不能及時送檢，可置4～8℃冰箱暫時保存，2h內(nèi)送檢。
04
標本接收
標本送達檢驗科后，工作人員核對標本相關(guān)信息，檢查采集容器是否符合要求，是否有滲漏，標本量是否足夠。標本接收后應(yīng)及時進行檢驗，久置可致細胞破壞，影響細胞計數(shù)及分類；對于部分不合格標本(如標本容器選擇錯誤、標本量小于1ml、送檢不及時等情況），可執(zhí)行讓步接收和讓步檢驗，及時與臨床進行溝通，并在報告單上中備注說明標本狀況對檢驗結(jié)果的影響。
05
檢驗程序
5.1 理學檢查 包括腦脊液外觀、透明度、球蛋白定性等。
5.2 細胞計數(shù) 包括細胞總數(shù)、有核細胞計數(shù)及紅細胞計數(shù)等，計數(shù)結(jié)果以×106/L 單位報告。
5.3 制片 推薦采用細胞玻片離心法進行細胞及其他有形成分的收集。每次制片取混勻后的腦脊液約500微升（細胞數(shù)較多時，可適當減少用量），離心速度800rpm，離心時間8～10min。試管離心沉淀后取沉淀物涂片的方法不適用于腦脊液細胞學檢查。
5.4 染色 瑞-吉染色為腦脊液細胞形態(tài)學檢驗的常規(guī)染色方法，必要時加做其它染色法，如墨汁染色、革蘭氏染色、抗酸染色、普魯士藍染色等。
5.5 閱片 低倍鏡下快速瀏覽全片，結(jié)合常規(guī)細胞計數(shù)結(jié)果，判斷涂片細胞收集效果是否滿意。如收集效果不滿意，應(yīng)重新制片。低倍鏡下觀察有無異常細胞或病原成分，發(fā)現(xiàn)異常成分時轉(zhuǎn)油鏡下進一步確認和識別。
5.6 細胞分類 在油鏡下進行有核細胞分類，結(jié)果以百分比形式表示。如全片有核細胞數(shù)不足50個，可以“全片可見有核細胞多少個，其中**細胞多少個”的形式進行描述。
06
報告
細胞學報告推薦采用圖文報告形式，內(nèi)容包括常規(guī)、細胞學和實驗室提示三部分。
6.1 常規(guī)部分 包括顏色、透明度、球蛋白定性、細胞總數(shù)、有核細胞計數(shù)、紅細胞計數(shù)及有核細胞分類等。
6.2 細胞學部分 包括圖像和形態(tài)學描述。用圖像采集系統(tǒng)在鏡下選擇2～4幅有代表性的圖片進行報告。對細胞學表現(xiàn)進行必要的形態(tài)描述，包括細胞分布、細胞大小、胞核大小、核形、核染色質(zhì)特點、核仁大小與數(shù)量、胞質(zhì)顏色及內(nèi)容物等。同時報告其他異常成分，如細菌、真菌及菌絲、寄生蟲、結(jié)晶等。
6.3 實驗室提示 根據(jù)細胞學表現(xiàn)，結(jié)合患者臨床表現(xiàn)、影像檢查及實驗室檢查相關(guān)結(jié)果綜合分析，向臨床提供合理性提示和建議。
07
涂片保存
報告發(fā)出后，對涂片進行分類歸檔，妥善保管，保存時限按各實驗室標準操作規(guī)程進行處置，一般保存3～5年。
08
生物安全防護
8.1 標本的采集、運送必須符合生物安全要求，防止溢出。如標本溢出后，應(yīng)立即對污染的環(huán)境和設(shè)備進行消毒處理。
8.2 檢驗人員在處理標本時，需做好個人防護，嚴格執(zhí)行生物安全管理程序，對有明確傳染性的標本按級別進行防護。
8.3 廢棄標本及其它相關(guān)的廢棄物，嚴格執(zhí)行醫(yī)療廢物處理流程。
09
臨床意義
9.1 常見細胞及臨床意義
9.1.1 紅細胞 正常腦脊液中不存在紅細胞。腦脊液中出現(xiàn)紅細胞，見于各種原因引起的出血，如腦出血（病理性）、蛛網(wǎng)膜下腔出血（病理性）及腰穿損傷出血（非病理性）等。
9.1.2 淋巴細胞 正常腦脊液中有少量的淋巴細胞，約占有核細胞總數(shù)的60%～70%。受抗原刺激后，淋巴細胞形態(tài)和功能可發(fā)生改變，按形態(tài)學分為小淋巴細胞、大淋巴細胞、激活淋巴細胞等。
9.1.3 漿細胞 正常腦脊液中不存在漿細胞。漿細胞的出現(xiàn)，提示體液免疫反應(yīng)的存在。
9.1.4 單核細胞 正常腦脊液中有少量的單核細胞，形態(tài)與外周血中單核細胞相似，約占有核細胞總數(shù)的30%～40%，與淋巴細胞的比例為4∶6或3∶7。疾病狀態(tài)下，單核細胞受到抗原或各種理化因素的刺激時，形態(tài)會發(fā)生變化，表現(xiàn)為胞體、胞核增大，胞膜不規(guī)整，可有瘤狀突起，胞質(zhì)著色加深，胞質(zhì)出現(xiàn)多個空泡，稱為激活單核細胞。
9.1.5 中性粒細胞 正常腦脊液中不存在中性粒細胞，但外周血中的中性粒細胞可因腰椎穿刺損傷隨紅細胞帶入，應(yīng)予識別。中性粒細胞的出現(xiàn)提示機體存在炎癥反應(yīng)，常見于各種中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染，無診斷特異性；也可見于顱腦外傷、顱腦術(shù)后、腫瘤、腦出血、蛛網(wǎng)膜下腔出血等。
9.1.6 嗜酸性粒細胞 正常腦脊液中不存在嗜酸性粒細胞。嗜酸性粒細胞的數(shù)量或比例明顯增多時，提示機體存在過敏反應(yīng)或寄生蟲感染的可能。
9.1.7 嗜堿性粒細胞 正常腦脊液中不存在嗜堿性粒細胞，它的出現(xiàn)提示存在過敏反應(yīng)，可見于各種炎癥、異物反應(yīng)、寄生蟲感染等，無診斷特異性。
9.1.8 吞噬細胞 正常腦脊液中不存在吞噬細胞。紅細胞吞噬細胞、含鐵血黃素吞噬細胞及膽紅素吞噬細胞的出現(xiàn)提示陳舊性出血。吞噬細胞吞噬功能強大，可吞噬各種異物，包括變性的白細胞、吞噬細胞和病原體等。
9.1.9 脫落細胞 各種原因?qū)е履X室中的室管膜細胞、脈絡(luò)叢細胞及蛛網(wǎng)膜下腔中的蛛網(wǎng)膜細胞脫落時，可在腦脊液中偶然發(fā)現(xiàn)，無診斷特異性。
9.1.10 腫瘤細胞 腦脊液中的腫瘤細胞來源于中樞神經(jīng)系統(tǒng)原發(fā)性腫瘤和繼發(fā)性腫瘤。前者可見于惡性程度較高的髓母細胞瘤、膠質(zhì)瘤、生殖細胞瘤、室管膜瘤和腦膜瘤等；后者常見于肺癌、乳腺癌、黑色素瘤、胃癌、白血病及淋巴瘤等向中樞神經(jīng)系統(tǒng)轉(zhuǎn)移。
9.2 常見細胞學表現(xiàn)及臨床意義
9.2.1 正常腦脊液細胞學表現(xiàn) 外觀呈無色透明，白細胞數(shù)不高于5╳106/L，由淋巴細胞和單核細胞組成，兩者比值為7∶3或6∶4，細胞形態(tài)規(guī)整，無明顯的細胞激活表現(xiàn)。
9.2.2 淋巴細胞反應(yīng)型 有核細胞計數(shù)可正常或顯著升高，鏡下可見淋巴細胞比例明顯增多，可見激活淋巴細胞、漿細胞及少量單核細胞和中性粒細胞等。臨床意義：常見于病毒性腦膜炎，也可見于其它中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病、免疫性疾病和腫瘤。
9.2.3 中性粒細胞反應(yīng)型 有核細胞數(shù)中度至顯著升高，鏡下可見大量的中性粒細胞，可伴少量淋巴細胞、單核細胞或漿細胞，有時可見病原菌。臨床意義：提示急性炎性反應(yīng)，見于細菌性腦膜炎、結(jié)核性腦膜炎滲出期，也可見于腦出血、蛛網(wǎng)膜下腔出血及顱腦手術(shù)后等非急性炎性反應(yīng)。
9.2.4 嗜酸性粒細胞-漿細胞反應(yīng)型 有核細胞數(shù)可正?；蜉p中度升高，鏡下可見嗜酸性粒細胞和漿細胞比例明顯升高，常伴少量淋巴細胞和單核細胞等。臨床意義：常見于腦寄生蟲感染，也可見于結(jié)核性腦膜炎、隱球菌性腦膜炎、顱腦手術(shù)后及蛛網(wǎng)膜下腔出血病患者。
9.2.5 淋巴-單核細胞反應(yīng)型 有核細胞數(shù)基本正?；蜉p度增高，鏡下可見少量淋巴細胞、單核細胞，部分淋巴及單核細胞可見激活表現(xiàn)。臨床意義：多見于疾病的恢復(fù)期，需與先前的細胞學表現(xiàn)進行比較分析。
9.2.6 淋巴-中性粒細胞反應(yīng)型 有核細胞數(shù)中度至顯著升高，鏡下可見中性粒細胞及淋巴細胞明顯增多，偶見單核細胞或漿細胞等。臨床意義：提示炎性反應(yīng)。多見于中樞神經(jīng)系統(tǒng)細菌感染治療后、結(jié)核性腦膜炎、真菌感染和顱腦術(shù)后等，需結(jié)合病史、患者臨床癥狀及體征和實驗室相關(guān)檢查結(jié)果綜合考慮。
9.2.7 混合細胞反應(yīng)型 有核細胞數(shù)中度至顯著升高，鏡下可見中性粒細胞、淋巴細胞、單核細胞等多種細胞同時存在，以中性粒細胞和淋巴細胞為主，也可伴少量漿細胞、嗜酸性粒細胞的出現(xiàn)。臨床意義：提示炎性反應(yīng)，與淋巴-中性粒細胞反應(yīng)型臨床意義基本一致。多見于中樞神經(jīng)系統(tǒng)細菌感染治療后、結(jié)核性腦膜炎、真菌感染和顱腦術(shù)后等，需結(jié)合病史、患者臨床癥狀及體征和實驗室相關(guān)檢查結(jié)果綜合考慮。部分結(jié)核性腦膜炎患者抗結(jié)核治療后，在相當長一段時間內(nèi)細胞學可表現(xiàn)為混合細胞反應(yīng)型，這一特點對診斷結(jié)核性腦膜炎具有一定的參考價值。
10
參考文獻
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10.10 彭明婷.臨床血液與體液檢驗.北京:人民衛(wèi)生出版社，2017.
二、專家組成員（按姓氏拼音順序排序）
柏世玉（山東省泰安市中心醫(yī)院）
曹 科（深圳市兒童醫(yī)院）
竇心靈（酒泉市人民醫(yī)院）
丁邦勝（中科大一附院（安徽省立醫(yī)院））
段愛軍（河南信合醫(yī)院）
樊愛琳（附屬）
高菊興（ 臨沂市人民醫(yī)院）
顧劍飛（復(fù)旦大學附屬華山醫(yī)院）
高建軍（河北邯鄲市第一醫(yī)院）
高海燕（哈爾濱醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院）
黃道連（南方醫(yī)科大學附屬中山市博愛醫(yī)院）
何 勇（湖南保靖縣人民醫(yī)院）
黃 ?。ǔ啥际械谌嗣襻t(yī)院-臨床醫(yī)學檢驗部）
胡 晶（重慶醫(yī)科大學檢驗醫(yī)學院）
蔣錦文（浙江省東陽市人民醫(yī)院）
金鑫（浙江省立同德醫(yī)院）
盧興國（浙江大學附屬第二醫(yī)院）
李相磊（開封市中心醫(yī)院）
劉超群（金華市中醫(yī)醫(yī)院）
梁 勤（甘肅省中醫(yī)院）
林慧君（浙江省人民醫(yī)院）
繆 峰（原山東省寄生蟲病防治研究所）
潘 ?。ê｛}縣人民醫(yī)院）
茹進偉（樂昌市人民醫(yī)院）
孫宏華（中山大學附屬第七醫(yī)院（深圳））
吳 茅（浙江省人民醫(yī)院）
王敏敏（杭州市第一人民醫(yī)院）
王哲（河北省保定第一醫(yī)院）
許紹強（廣東三九腦科醫(yī)院）
夏萬寶（上海市松江區(qū)中心醫(yī)院）
邢銘芬（湖州市南潯區(qū)人民醫(yī)院）
許銀懷（河南省濮陽市疾病預(yù)防控制中心）
岳保紅（鄭州大學第一附屬醫(yī)院、鄭州大學醫(yī)學檢驗系）
閆立志（內(nèi)蒙古包鋼醫(yī)院）
張時民（北京協(xié)和醫(yī)院）
張建富（江蘇省人民醫(yī)院，南京醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院）
曾強武（貴州中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院）
趙成艷（大連醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院）
朱鳳嬌（浙大一院三門灣分院）
莊順紅（浙江省金華市中心醫(yī)院）
周道銀（上海長海醫(yī)院）
周玉利（杭州市第一人民醫(yī)院）
鄭智弦（梧州市紅十字會醫(yī)院）
周麟（諸暨市中醫(yī)醫(yī)院）
鄭 瑞（浙江省臺州醫(yī)院）
三、執(zhí)筆：閆立志
四、主審：許紹強 周道銀 吳茅 張時民 黃道連 樊愛琳 段愛軍
五、定稿會
江蘇南京，2020年7月17～19日
END
