經(jīng)歷三年新冠疫情，我們在新冠的診斷和治療方面已收獲豐富的經(jīng)驗(yàn)。但我們也看到，現(xiàn)在依然遇到一些「長新冠」的問題，「長新冠」的問題包括：血栓、感染后咳嗽、新冠病毒繼發(fā)感染……我相信到目前為止我們所有的醫(yī)院，都還會(huì)遺留一些重癥患者無法出院，無法脫機(jī)。這些患者當(dāng)中，其實(shí)很多人都存在新冠病毒感染以后繼發(fā)的真菌感染或者細(xì)菌感染，甚至是混合感染的問題。所以，我想《新冠病毒感染繼發(fā)真菌感染的診治》這是一個(gè)非常重要的臨床話題。
奧密克戎傳播力強(qiáng)，致病力有所下降，新冠防控的重點(diǎn)轉(zhuǎn)換到防重癥
首先想結(jié)合臨床診療過程中的體會(huì)，談?wù)凜OVID-19相關(guān)真菌感染流行情況及診斷方法推薦，然后再與大家分享IFD實(shí)驗(yàn)室診斷方法及應(yīng)用。
新型冠狀病毒（SARS-CoV-2）屬于β屬的冠狀病毒，有包膜，顆粒呈圓形或橢圓形，直徑60-140nm。WHO提出「關(guān)切的變異株」有5個(gè)，分別為阿爾法、貝塔、伽瑪、德爾塔和奧密克戎。奧密克戎變異株傳播力和免疫逃逸能力顯著增強(qiáng)，在2022年初迅速取代德爾塔變異株成為全球絕對(duì)優(yōu)勢流行株。奧密克戎變異株肺部致病力明顯減弱，臨床表現(xiàn)已由肺炎為主衍變?yōu)橐陨虾粑栏腥緸橹鳌５M管奧密克戎從臨床表現(xiàn)來講它的毒株致病力比原始的毒株有所減弱，但也并非每個(gè)患者都是輕癥或無癥狀。在整個(gè)疫情防控中，我們看到了不少脆弱群體，即使感染奧密克戎毒株，也會(huì)導(dǎo)致致死性的打擊。
新型冠狀病毒感染呈世界性流行。據(jù)WHO報(bào)道[1]，截至2022年12月31日，全球累計(jì)報(bào)告確診病例6.5億例，累計(jì)死亡病例667萬例，不同國家及地區(qū)的流行趨勢存在差異。2022年12月隨著新冠疫情防控政策的調(diào)整，全國新冠病毒感染數(shù)量明顯增加，重癥新冠感染患者的救治成為醫(yī)療機(jī)構(gòu)面臨的重大挑戰(zhàn)。
繼發(fā)感染主要發(fā)生在高齡、脆弱人群的COVID-19后期，細(xì)菌、真菌為繼發(fā)感染的主要病原體
新冠病毒感染后疾病特點(diǎn)分為三個(gè)階段，即早期、中期和后期。早期是病毒感染后的病毒快速復(fù)制期，一般持續(xù)時(shí)間不超過7天，但這也不是絕對(duì)的。我們在臨床上遇到一些淋巴瘤的患者，宿主免疫功能低下的如腫瘤患者群體（尤其淋巴瘤），有的患者歷經(jīng)一兩個(gè)月依然會(huì)出現(xiàn)病毒復(fù)制。但大部分人群早期復(fù)制時(shí)間在7天以內(nèi)；中期往往是以繼發(fā)免疫損傷為主，也就是我們常講的「炎癥風(fēng)暴」。臨床上看到過很多患者的肺炎發(fā)生在感染后5-7天，發(fā)生后一般持續(xù)7-14天。曹彬教授團(tuán)隊(duì)提出了關(guān)于病毒膿毒癥的假說，大家可能在臨床診治過程中都有深刻的體會(huì)；后期一般多為2周后，患者發(fā)生炎癥風(fēng)暴之后出現(xiàn)了很多問題，此階段主要是繼發(fā)感染的問題，其中肺栓塞可能也伴隨炎癥風(fēng)暴開始出現(xiàn)。
在對(duì)新冠患者的臨床診治過程中，我們看到不少患者存在著新冠病毒感染繼發(fā)真菌感染的問題，提示我們需要特別地關(guān)注，要增加病原體的檢測，積極地早期應(yīng)對(duì)，才可能更好地改善患者的預(yù)后。同時(shí)，關(guān)于新冠治療方面，臨床實(shí)踐也提示我們，盡早病毒清除是關(guān)鍵。而抗新冠病毒治療應(yīng)早發(fā)現(xiàn)早診斷早干預(yù)，一旦感染，患者應(yīng)及時(shí)服用抗新冠病毒的藥物。目前，小分子藥物在安全性和有效性在臨床應(yīng)用中已被證實(shí)，能幫助患者在早期抗病毒治療后盡早清除病毒。
繼發(fā)感染的患者往往都是目前各大醫(yī)院里短期內(nèi)無法出院的重癥患者。哪些患者容易發(fā)生繼發(fā)感染呢？往往都是COVID-19后期的患者。
第一是年齡大的高齡患者。我團(tuán)隊(duì)在美國呼吸與危重癥雜志發(fā)表的文章，2020年已經(jīng)提出，如果以70歲為界的話，患者的重癥率非常高，死亡率明顯增加；
第二是有基礎(chǔ)疾病的患者。很多脆弱人群比如糖尿病、高血壓、心血管疾病、腦血管疾病，以及需要透析的患者、血液系統(tǒng)腫瘤患者；
第三是免疫功能受損的患者。有自身免疫性疾病、長期使用免疫藥的患者，以及實(shí)體器官移植、長期使用免疫抑制劑的患者，這些人群都是脆弱群體；
第四是抗炎藥物的應(yīng)用。在新冠疫情中我們會(huì)對(duì)一些重癥患者使用激素，比如用到妥珠單抗、巴瑞替尼等等，這些藥物實(shí)際上是「雙刃劍」，它可能會(huì)抑制機(jī)體免疫，導(dǎo)致繼發(fā)感染；
第五是ICU相關(guān)的氣管插管。很多患者可能存在多臟器功能衰竭，可能會(huì)用氣管插管、深靜脈導(dǎo)管、鼻飼等等，各種侵入性的操作都可能導(dǎo)致繼發(fā)感染。
從臨床角度分析重癥/危重癥COVID-19患者繼發(fā)感染特點(diǎn)，細(xì)菌、真菌為主要的繼發(fā)感染病原菌。國內(nèi)這項(xiàng)回顧性、多中心隊(duì)列研究，38例重癥/危重癥COVID-19患者，其中22例（57.89%）患者出現(xiàn)繼發(fā)感染，危重患者的繼發(fā)感染率遠(yuǎn)高于重癥患者[83.33% (20/24) vs 14.29% (2/14), P<0.0001]；21例呼吸道感染、13例血流感染、7例尿路感染[2]。
因此也就是說，危重癥患者的繼發(fā)感染率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于重癥患者，病情越重繼發(fā)感染的風(fēng)險(xiǎn)越重。我們這次成功搶救了一個(gè)患者，他就是一個(gè)有呼吸系統(tǒng)綜合征、體重100公斤以上的患者，他當(dāng)時(shí)就出現(xiàn)了耐碳青霉烯的肺炎克雷伯菌（CRKP）的尿路感染。以此為例告訴我們，在診治危重癥新冠感染患者的時(shí)候，不僅僅要關(guān)注呼吸道繼發(fā)感染，還要關(guān)注血流繼發(fā)感染、尿路繼發(fā)感染的問題。
簡單做一下分類：1.呼吸道繼發(fā)感染：細(xì)菌—肺炎克雷伯菌、糞腸球菌、鮑曼不動(dòng)桿菌；真菌—曲霉菌。2.血流繼發(fā)感染：細(xì)菌—肺炎克雷伯菌、大腸桿菌；真菌—白色念珠菌、隱球菌、阿薩西毛孢子菌。
我們團(tuán)隊(duì)于2020年1月底協(xié)助金銀潭醫(yī)院發(fā)表在《柳葉刀》雜志文章強(qiáng)調(diào)了細(xì)菌感染、真菌感染是面對(duì)新冠病毒特別需要關(guān)注的；血流感染中，細(xì)菌類比如肺炎克雷伯菌、大腸桿菌，而真菌方面大家可能見到較多的是曲霉和白色念珠菌，因?yàn)榘咨钪榫莾?nèi)源性、侵入性的感染。相對(duì)而言隱球菌、阿薩西毛孢子菌比較少[3]。
剖析COVID-19患者繼發(fā)真菌感染的機(jī)制，國內(nèi)外高級(jí)別專家均特別強(qiáng)調(diào)重視COVID-19重癥/危重癥患者真菌病原體篩查
COVID-19后期為什么會(huì)出現(xiàn)繼發(fā)真菌感染？這是CAPA和CAM涉及的免疫途徑。從機(jī)制上來分析：新冠病毒感染導(dǎo)致肺泡上皮損傷，釋放促炎細(xì)胞因子和趨化因子，巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞募集至肺部，進(jìn)一步誘發(fā)「細(xì)胞因子風(fēng)暴」，過度炎癥導(dǎo)致免疫失調(diào)，促進(jìn)了肺部真菌侵襲感染。
肺泡細(xì)胞損傷生成纖維蛋白，減少氧氣及二氧化碳的擴(kuò)散，缺氧環(huán)境會(huì)影響真菌毒力和宿主免疫反應(yīng)。而真菌代謝物可通過破壞宿主組織、抑制血管生成和組織修復(fù)來進(jìn)一步增加全身缺氧狀況。
毛霉菌具有特定的毒力因子，也會(huì)促進(jìn)血管損傷，在COVID-19 患者中發(fā)病率相對(duì)較高。包括我們的病例中也會(huì)碰到曲霉和毛霉混合感染的情況。
同時(shí)我們也看到，國內(nèi)外一些高級(jí)別專家都特別強(qiáng)調(diào)重視COVID-19重癥/危重癥患者真菌病原體篩查：法國公共衛(wèi)生高級(jí)委員會(huì)建議對(duì)新冠肺炎患者進(jìn)行系統(tǒng)的真菌病原體篩查；李蘭娟院士及其同事積累了嚴(yán)重新冠肺炎治療經(jīng)驗(yàn)，提醒臨床醫(yī)生應(yīng)關(guān)注患者的真菌感染，尤其是嚴(yán)重疾病或免疫功能低下的患者。
其中提到了COVID-19重癥患者有必要接受真菌病原體監(jiān)測，包括：
當(dāng)然，組織病理學(xué)這個(gè)檢查可能對(duì)新冠重癥患者來說稍微有點(diǎn)困難，因?yàn)橛械幕颊卟∏楹苤?，取組織病理活檢可能存在一些風(fēng)險(xiǎn)。而血的檢測相對(duì)來講比較方便，還可以做PCR、NGS等這些檢測。
還有一些報(bào)道顯示了COVID-19相關(guān)真菌感染流行情況。2020年1月-2021年6月所發(fā)表的168篇研究報(bào)道中，納入了58,784 COVID-19感染患者，其中4099例（6.97%）患者繼發(fā)侵襲性真菌感染。主要病原菌包括曲霉屬、毛霉目、念珠菌屬[3]。
病例報(bào)道中CAPA整體死亡率為52.7%；觀察性研究中CAPA發(fā)病率0.1-57.1%；85%的研究來自于ICU危重癥患者[4]。新冠相關(guān)毛霉菌病CAM：病例報(bào)道中CAM患者整體死亡率為50.8%；觀察性研究中CAM患者整體死亡率為16%[4]。新冠相關(guān)念珠菌病CAC：病例報(bào)道中CAC患者整體死亡率為56.1%；觀察性研究中，念珠菌血癥的平均發(fā)病率為3.8%，粗死亡率為74.8%[4]。其他真菌感染類型：20例肺孢子菌肺炎、5例隱球菌病、4例組織胞漿菌病、1例球孢子菌感染、1例肺部鐮刀菌感染、1例肺部足放線病菌感染[4]。這些病例數(shù)相對(duì)少，但也需要我們?nèi)リP(guān)注。
我們團(tuán)隊(duì)2020年發(fā)表在《柳葉刀》的臨床研究顯示武漢金銀潭醫(yī)院收治的99例COVID-19患者中，繼發(fā)真菌感染的發(fā)病率為5.0%（5/99）。鮑曼不動(dòng)桿菌、肺炎克雷伯菌和黃曲霉均在1名患者中培養(yǎng)；1例真菌感染被診斷為光滑念珠菌；3例真菌感染診斷為白色念珠菌[3]。
2020年《柳葉刀呼吸醫(yī)學(xué)》雜志發(fā)表一項(xiàng)單中心回顧性觀察性研究：2019年11月24日-2020年1月26日，武漢金銀潭醫(yī)院收治的52例COVID-19重癥患者：3例患者繼發(fā)真菌感染，發(fā)病率為5.8% (3/52)，包括1例黃曲霉、1例煙曲霉、1例白念珠菌[5]。
很多同道也發(fā)表了新冠病毒感染繼發(fā)一些真菌感染的問題。比如2021年《實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志》報(bào)道：2020年1月23日- 4月22日，廣州市第八人民醫(yī)院125例COVID-19患者進(jìn)行細(xì)菌及真菌培養(yǎng)。125例患者各類標(biāo)本中共有19例細(xì)菌或真菌培養(yǎng)陽性，其中細(xì)菌陽性12例（63.2%），真菌陽性7 例（36.8%）；真菌培養(yǎng)陽性病例均為念珠菌，包括白色念珠菌、光滑念珠菌、季也蒙念珠菌[6]。2021年《中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志》報(bào)道：同濟(jì)醫(yī)院2020年2月10日-3月31日，病原菌培養(yǎng)陽性的COVID-19患者中非危重型23例，危重型72例：共檢出病原菌179株，非危重型患者35株[42.9%(15/35)為真菌]，危重型患者144株[32.6%(47/144)為真菌]；真菌培養(yǎng)中，非危重型和危重型患者均為白色念珠菌檢出率最高，各占53.33%（8/15）和53.19%（25/47），近平滑念珠菌在危重型患者血液中檢出率較高，為36.36%(4/11)[7]。
還有一項(xiàng)對(duì)CAPA觀察性研究：5953例患者多數(shù)病例來自于歐洲（79.9%），盡管納入的中國地區(qū)CAPA病例數(shù)量不多，但值得注意的是中國入住ICU的COVID-19患者仍處于中高水平的發(fā)病率[8]。
我們要關(guān)注到的是，重癥COVID-19患者罹患CAPA發(fā)病率約為7.1-15.1%，而中國數(shù)據(jù)處于中高水平。
哪些是CAPA的高危因素呢？主要危險(xiǎn)因素就是激素等抗炎藥物使用。使用激素需要掌握好時(shí)機(jī)，在炎癥風(fēng)暴比較強(qiáng)的時(shí)機(jī)用是有較大意義的，但并不主張長療程、大劑量使用激素。CAPA的危險(xiǎn)因素包括：ICU環(huán)境空氣暴露；全身性皮質(zhì)類固醇過度使用；潛在的慢性阻塞性肺?。挥蒀OVID-19引起的肺上皮性損傷；年齡較大；ICU住院機(jī)械通氣。潛在危險(xiǎn)因素包括：ICU空氣負(fù)壓；肝臟疾病；紅霉素使用；實(shí)體腫瘤；多發(fā)性骨髓瘤；AIDS/HIV；肺血管疾病。
如何做好對(duì)CAPA的診斷？2020年ECMM/ISHAM發(fā)表的CAPA定義與管理共識(shí)。提出，CAPA分為氣管支氣管型和肺型兩種。分層診斷：確診（proven）、臨床診斷（probable）、擬診（possible）[9]。
納入分層診斷標(biāo)準(zhǔn)的宿主因素：從入院到收入ICU之間的2周內(nèi)SARS-CoV-2核酸檢測(RT-PCR)呈陽性；或在收入ICU后72-96小時(shí)內(nèi)SARS-CoV-2核酸檢測呈陽性。
COVID-19相關(guān)肺曲霉菌病從影像學(xué)來說，曲霉菌的感染形態(tài)往往是多變的，影像學(xué)呈氣道分布、具有多病灶、多形性、多變性的特征?？赡苁且恍┒喟l(fā)的空洞一樣的多形性的改變。
這是病毒感染后繼發(fā)曲霉菌感染表現(xiàn)為氣管支氣管炎型。
這是我們RICU收治的一例流感病毒感染繼發(fā)IPA的影像學(xué)改變。這個(gè)患者是侵襲性的曲霉，患者最終死亡。從影像學(xué)中可以看到病變非常嚴(yán)重，沿著支氣管的分布，出現(xiàn)非常密集、多發(fā)的病變，而且有多發(fā)的空洞壞死。因此可見混合感染會(huì)給患者帶來非常大的危害。
關(guān)于COVID-19相關(guān)真菌感染的診斷需要綜合分析、分級(jí)診斷
關(guān)于肺型CAPA診斷，分為肺型和氣管支氣管感染型；確診CAPA依據(jù)（至少符合以下一項(xiàng)）：組織病理或直接鏡檢曲霉菌陽性；肺部無菌針吸或活檢標(biāo)本培養(yǎng)有曲霉生長、或鏡檢陽性、或組織學(xué)陽性、或PCR檢測曲霉菌陽性；
臨床診斷的微生物學(xué)依據(jù)（至少符合以下一項(xiàng)）：BALF鏡檢曲霉菌陽性；BALF真菌培養(yǎng)曲霉菌陽性；血清GM＞0.5，或血清膠體金GM＞0.5；BALF-GM＞1.0，或BALF膠體金GM＞1.0；≥2次血漿/血清/全血PCR曲霉菌陽性；單次BALF-PCR曲霉菌陽性；單次血漿/血清/全血PCR曲霉菌陽性，且單次BLAF-PCR陽性。臨床表現(xiàn)（至少符合以下一項(xiàng)）：難治性發(fā)熱；胸膜摩擦感；咯血。非其他因素造成的肺部CT影像學(xué)表現(xiàn)（至少符合以下一項(xiàng)）：肺部浸潤；空洞浸潤。
擬診同樣也要綜合考量，比如臨床表現(xiàn)（至少符合以下一項(xiàng)）：難治性發(fā)熱；胸膜摩擦感；咯血。非其他因素造成的肺部CT影像學(xué)表現(xiàn)（至少符合以下一項(xiàng)）：肺部浸潤；空洞浸潤。微生物學(xué)依據(jù)（至少符合以下一項(xiàng)）：非支氣管鏡灌洗液鏡檢曲霉菌陽性；非支氣管鏡灌洗液培養(yǎng)曲霉菌陽性；單次非支氣管鏡灌洗液GM＞4.5；≥2次非支氣管鏡灌洗液GM＞1.2；非支氣管鏡灌洗液GM＞1.2，且非支氣管鏡灌洗液其他曲霉檢測陽性（PCR/膠體金GM試驗(yàn)）。
關(guān)于氣管支氣管型CAPA的診斷，確診依據(jù)（至少符合以下一項(xiàng)）：組織病理或直接鏡檢曲霉菌陽性；肺部無菌針吸或活檢標(biāo)本培養(yǎng)、或鏡檢、或組織學(xué)檢查、或PCR檢測曲霉菌陽性。臨床診斷中，臨床表現(xiàn)（至少符合以下一項(xiàng)）：氣管支氣管潰瘍；結(jié)節(jié)；假膜；斑塊；焦痂。微生物學(xué)依據(jù)（至少符合以下一項(xiàng)）：BALF直接鏡檢曲霉菌陽性；BALF培養(yǎng)、或PCR曲霉陽性；血清GM＞0.5，或BALF膠體金GM＞0.5；BALF-GM＞1，或BALF膠體金GM＞1。
除曲霉之外還要關(guān)注到COVID-19相關(guān)毛霉菌病CAM，以及CAM高危因素、CAM的診斷……COVID-19相關(guān)念珠菌病CAC同樣不容忽視
除了曲霉我們還應(yīng)關(guān)注毛霉（COVID-19相關(guān)毛霉菌病CAM），COVID-19合并毛霉病在印度2021年早期的第二波疫情中獲得關(guān)注。兩種嚴(yán)重的繼發(fā)真菌感染均伴隨高死亡率和不良預(yù)后。
簡單梳理COVID-19和CAM關(guān)鍵事件：
CAM的危險(xiǎn)因素，比如：務(wù)農(nóng)；環(huán)境空氣暴露；ICU環(huán)境空氣暴露；在COVID-19期間反復(fù)進(jìn)行鼻咽拭子檢測；鐵超負(fù)荷；性行為；Covid-19相關(guān)低氧血癥；長時(shí)間使用口罩；全身性皮質(zhì)類固醇過度使用；惡性腫瘤；新診斷的和未受控制的糖尿??；實(shí)體器官移植；糖尿病酮癥酸中毒；ICU住院機(jī)械通氣。潛在因素如廣譜抗生素。
對(duì)CAM的診斷我們參考ECMM/ISHAM中低收入國家CAM臨床管理建議[10]。首先通過單一SARS-CoV-2 RNA PCR或SARS-CoV-2抗原+臨床表現(xiàn)+影像學(xué)+組織病理+微生物學(xué)證據(jù)確認(rèn)患者為COVID-19。沒有建議明確的分層診斷，根據(jù)宿主因素、影像學(xué)、微生物檢查綜合診斷。
CAM宿主因素要關(guān)注到環(huán)境因素：室內(nèi)（家庭/醫(yī)院）毛霉暴露；從事農(nóng)業(yè)活動(dòng)；戶外毛霉暴露/接觸史。還有患者因素：皮質(zhì)固醇藥物治療；鐵過載；糖尿??；SARSCoV介導(dǎo)的外分泌損傷。還要關(guān)注到患者鼻-眶-腦毛霉?。≧OCM）影像學(xué)：鼻竇黏膜增厚和混濁；水腫；炎癥；腦梗塞。尤其要注意到肺毛霉病影像學(xué)：厚壁空洞（注意與COVID-19相區(qū)分）；反暈輪征；多發(fā)結(jié)節(jié)；胸腔積液。其中反暈輪征是格外典型的一個(gè)特征。此外我們還要尋找微生物學(xué)依據(jù)：鼻樣本可為ROCM提供早期線索；BALF、非支氣管鏡灌洗、支氣管活檢可為肺毛霉病提供早期線索。組織病理、通過內(nèi)窺鏡采集的清創(chuàng)組織/活檢樣本、CT引導(dǎo)的活檢分離出毛霉菌，可證實(shí)毛霉病。根據(jù)鏡檢、PCR、和基質(zhì)輔助激光解吸/電離-飛行時(shí)間(MALDI-TOF)可對(duì)毛霉菌種進(jìn)行鑒定。重復(fù)G試驗(yàn)、GM試驗(yàn)、曲霉PCR均為陰性，且高度懷疑患者肺部侵襲性霉菌感染時(shí)，可能為肺毛霉菌病。
呼吸醫(yī)生同樣也需要關(guān)注COVID-19相關(guān)念珠菌病CAC。CAC（COVID-19相關(guān)念珠菌?。┦状纬霈F(xiàn)于重癥監(jiān)護(hù)病房（ICU），與非COVID-19患者相比，COVID-19念珠菌血癥的發(fā)病率增加2-10倍。其整體發(fā)病率未有明確統(tǒng)計(jì)，但包括美洲、歐洲、中東在內(nèi)的12個(gè)國際及地區(qū)報(bào)道CAC暴發(fā)事件。主要為白念珠菌和耳念珠菌感染，主要引起血流和腹腔感染。美國一項(xiàng)多中心研究稱：COVID-19念珠菌血癥患者中，44%為白念珠菌感染[11]。2020年首例COVID-19相關(guān)的耳念珠菌血流感染病例被報(bào)道。COVID-19相關(guān)的耳念珠菌血流感染患者死亡率為30-83%[11]。
我們要注意到CAC的危險(xiǎn)因素：ICU住院；糖皮質(zhì)激素和其他免疫抑制劑；托珠單抗使用；AIDS/HIV；中心靜脈導(dǎo)管，包括耳廓導(dǎo)管；惡性腫瘤；既往有抗真菌暴露；年齡較大；廣譜抗生素使用；病情較嚴(yán)重/器官衰竭評(píng)估評(píng)分較高。
關(guān)于CAC的診斷，國內(nèi)學(xué)者發(fā)表綜述：結(jié)合COVID-19患者狀態(tài)、危險(xiǎn)因素、微生物學(xué)依據(jù)診斷CAC[12]。
CAC的危險(xiǎn)因素：腸外營養(yǎng)；廣譜抗菌藥物的使用；侵入性檢查。這些都是CAC的危險(xiǎn)因素。關(guān)于CAC診斷，我們也要有微生物學(xué)依據(jù)：直接鏡檢；血/無菌標(biāo)本培養(yǎng)；血清學(xué)檢測：G試驗(yàn)、念珠芽管抗體(CAGTA)、甘露聚糖和抗甘露聚糖IgG測試；念珠菌PCR檢測；T2磁共振和MALDI-TOF技術(shù)。
從鏡檢、血清學(xué)檢測到GM項(xiàng)目在CAPA中的應(yīng)用，從真菌血清學(xué)檢測到分子生物學(xué)、組織病理學(xué)……淺談IFD實(shí)驗(yàn)室診斷方法及應(yīng)用
關(guān)于IFD實(shí)驗(yàn)室診斷方法，我們主要參考2022年《侵襲性真菌病實(shí)驗(yàn)室診斷方法臨床應(yīng)用專家共識(shí)》。
比如直接鏡檢，我們要綜合考慮真菌直接鏡檢的優(yōu)缺點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)是直接鏡檢操作簡便、適用多種臨床樣本、可快速報(bào)告結(jié)果，但缺點(diǎn)有存在假陰性、敏感性不高、熒光染色成本增加。
直接鏡檢適用于支氣管肺泡灌洗液（BALF）、痰液、尿、糞、分泌物、腦脊液、引流液等多種臨床樣本。熒光染色可顯著提高真菌鏡檢的敏感性：建議臨床標(biāo)本直接用鈣熒光白（calcofluor white，CFW） 或博蘭卡風(fēng)（Blankophor）熒光染色檢測。該方法幾乎可以檢測所有真菌，并且具有高度敏感度和特異度。
血清學(xué)檢測大家已經(jīng)非常熟悉了。血清學(xué)檢測主要參考2022年《侵襲性真菌病實(shí)驗(yàn)室診斷方法臨床應(yīng)用專家共識(shí)》。
同樣，我們還要關(guān)注GM項(xiàng)目在CAPA中的應(yīng)用，要將其作為一個(gè)常規(guī)的檢測來應(yīng)用。當(dāng)然，真菌血清學(xué)檢測也是一個(gè)重要的手段。
熒光定量PCR現(xiàn)在比較多，當(dāng)然我們也不要完全依賴檢測結(jié)果，最終還是要回歸臨床綜合判斷。
組織病理學(xué)的角度，我們參照2022年《侵襲性真菌病實(shí)驗(yàn)室診斷方法臨床應(yīng)用專家共識(shí)》。但要注意對(duì)于新冠重癥患者而言，我們很難拿組織病理學(xué)的活檢結(jié)果。
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專家介紹
周敏
主任醫(yī)師，正教授，法國居里研究所博士后；瑞金醫(yī)院呼吸與危重醫(yī)學(xué)科副主任，博士生導(dǎo)師；中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病分會(huì)工作秘書，呼吸治療學(xué)組副組長；中華預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病預(yù)防與控制專委會(huì)委員；中國醫(yī)師協(xié)會(huì)呼吸分會(huì)慢阻肺委員會(huì)委員；上海醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病分會(huì)委員和慢阻肺學(xué)組副組長；上海女醫(yī)師協(xié)會(huì)肺部腫瘤專委會(huì)副主任委員；發(fā)表論文100余篇，SCI論著50余篇；主持科技部慢病重大專項(xiàng)1項(xiàng)，科技部重大專項(xiàng)子課題負(fù)責(zé)人1項(xiàng)，國家自然基金3項(xiàng)等多項(xiàng)課題，獲中國醫(yī)師協(xié)會(huì)呼吸分會(huì)優(yōu)秀中青年醫(yī)師獎(jiǎng)；上海市科委優(yōu)秀學(xué)科帶頭人、上海市杰出?？漆t(yī)師獎(jiǎng)。
* 本次系列直播由中日醫(yī)院呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科科主任助理王一民醫(yī)生主持。
本文由《呼吸界》編輯 冬雪凝 整理，感謝周敏教授的審閱修改！
本文完
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