血液離體后在自然環(huán)境中很快就會(huì)凝固,離體血液會(huì)激活外源性凝血因子,它能使纖維蛋白原變?yōu)槔w維蛋白從而導(dǎo)致血液凝固(內(nèi)源性凝血就是血管內(nèi)皮細(xì)胞受傷后破損釋放出一些因子引起凝血)。血液離體后正常凝固析出的是血清,里面沒有纖維蛋白原,而抗凝的血液放置一段時(shí)間或者經(jīng)離心后得到的上清液是血漿,血漿里含有纖維蛋白原!血樣放置過久會(huì)導(dǎo)致某些生化成分改變,如白細(xì)胞降解作用、紅細(xì)胞逐漸死亡;紅細(xì)胞中的鉀離子進(jìn)入血清使血清鉀升高;CO2逸散使其結(jié)果降低;血液pH值變化;酶活性降低或喪失等。 紅細(xì)胞消耗能量及細(xì)菌污染而分解葡萄糖使血糖濃度降低。GLU(血糖)在血樣放置2~3小時(shí)后可降低6.7%~15%,故監(jiān)測(cè)最好在2~3h內(nèi)完成,6h即超出實(shí)驗(yàn)室可接受范圍;BUN(尿素氮)、TBIL(總膽紅素)、電解質(zhì)的檢測(cè)最好在采集后4~6h內(nèi)完成檢測(cè);C02-CP(二氧化碳結(jié)合力)、K在6~24 h內(nèi)逐漸升高;ALT(血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶)在6h后逐漸下降。血小板計(jì)數(shù)增高的原因可能有:①隨著標(biāo)本放置時(shí)間越長,細(xì)胞破壞越多,分析儀誤將破碎的紅細(xì)胞碎片計(jì)數(shù)為血小板;②由于血細(xì)胞在體外也會(huì)進(jìn)行新陳代謝,使血漿滲透壓和pH值發(fā)生了改變;③同時(shí)還與溶血?jiǎng)┑姆N類、稀釋液的滲透壓、離子強(qiáng)度、儀器等因素有關(guān)。因此所有標(biāo)本應(yīng)在60min內(nèi)測(cè)定血小板,超過60min不能發(fā)報(bào)告。將近70%的靜脈抗凝血樣品和末梢血樣品在放置4℃、24h后hs-CRP測(cè)定值開始下降;隨放置時(shí)間的增加hs-CRP測(cè)定值也在不斷的下降,與即刻測(cè)定值比較偏移最大可達(dá)44%。但也有部分樣品放置24h或7d后測(cè)得的hs-CRP值高于即刻測(cè)定值,最高的1例靜脈抗凝血樣品存放7d后增高81%。標(biāo)本因置放時(shí)間延長,cTnl的濃度水平衰減梯度不呈正態(tài)分布,這可能與cTnl半衰期有關(guān)。肌鈣蛋白在循環(huán)血中的半衰期大約為數(shù)小時(shí),由腎臟排出體外,而游離cTnI在循環(huán)血中的半衰期大約為67min,與cTnI在血液存在形式有關(guān)。cTnI測(cè)定應(yīng)在20min內(nèi)完成,40min和60min分別測(cè)試其水平就會(huì)有所下降。對(duì)于NT-proBNP,在樣本放置24h內(nèi)檢測(cè)結(jié)果無變化,72h的檢測(cè)結(jié)果無明顯變化。血液離體后血漿中凝血因子被活化且有纖溶酶被激活,從而導(dǎo)致交聯(lián)纖維蛋白的形成并隨之發(fā)生降解,會(huì)有D-二聚體的產(chǎn)生,所以隨著血樣放置時(shí)間的延長,D-二聚體的測(cè)量值也會(huì)不同程度的升高,在-20℃條件下保存的樣本,7天之內(nèi)測(cè)定D-二聚體結(jié)果均無變化;故對(duì)于檢測(cè)D-二聚體的樣本最好在4小時(shí)內(nèi)完成,如不能及時(shí)出報(bào)告,應(yīng)將血漿放置4℃冰箱保存但不宜超過24小時(shí),24小時(shí)之內(nèi)不能檢測(cè)的標(biāo)本須放在-20℃冷凍保存,這樣才能保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。對(duì)于體外樣本,采用不同的采血管、不同放置時(shí)間都會(huì)對(duì)PCT造成影響。樣本放置12h時(shí)EDTA-K2管平均降解了(2.61±0.56)%,比較其他采血管,其降解速率最慢。分離膠管平均每小時(shí)降解0.46%,降解最快。在放置24h時(shí),普通干燥管、分離膠管、肝素鋰管、EDTA-K2管分別平均降解了(9.66±1.60)%、(11.01±1.62)%、(8.00±0.91)%、(3.86±0.76)%。放置72h時(shí),分離膠管平均降解率達(dá)到(41.25±1.68)%,仍為降解最快,而EDTA-K2管則僅平均降解(15.77±1.65)%。EDTA-K2抗凝標(biāo)本即使存放于4℃,在7d時(shí)與分離血漿即刻測(cè)定值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;存放于-70℃,樣本放置7d疊加反復(fù)凍融2次對(duì)測(cè)定結(jié)果無明顯影響。血樣放置過久會(huì)導(dǎo)致某些生化成分改變及其標(biāo)志物測(cè)定結(jié)果的改變,而現(xiàn)代發(fā)達(dá)科技能使血液樣本的存放時(shí)間大大延長,但并不意味著存放時(shí)間長久對(duì)檢測(cè)結(jié)果較好。一般說來未加促凝劑的血液離體后30min即可進(jìn)行血清分離操作,加有促凝劑的血10min就能進(jìn)行離心,抗凝血在抽血后可立即分離血漿。如果不能及時(shí)檢驗(yàn),則應(yīng)按檢測(cè)要求進(jìn)行標(biāo)本預(yù)處理。例如:血清分離后置2-4℃冰箱保存、制成去蛋白濾液、添加防腐劑等。需要注意血清冷藏前應(yīng)移吸入另外的加塞試管,勿與血細(xì)胞共存,否則可引起溶血及其它誤差因素。用于酶學(xué)檢測(cè)的血清不宜反復(fù)凍融,此外還應(yīng)注意保存時(shí)間不能太長,故實(shí)驗(yàn)室對(duì)血樣的處理應(yīng)根據(jù)其具體檢驗(yàn)項(xiàng)目做出相應(yīng)的明確規(guī)定。來源: 威可達(dá)醫(yī)療器械臨床試驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
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