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HPV相關(guān)的下生殖道鱗狀上皮腫瘤性病變(一)
引言
人乳頭瘤病毒相關(guān)的下生殖道鱗狀上皮腫瘤性病變在生物學(xué)和形態(tài)學(xué)方面具有相似之處因此目前建議采用統(tǒng)一的二級分類方案;不過,在不同的解剖部位會有不同的診斷標準及鑒別等問題。斯坦福大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理專家Eric J. Yang曾在《Surgical Pathology Clinics》雜志就相關(guān)問題進行了專門綜述。
 
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婦科醫(yī)師、外科醫(yī)師、腫瘤科醫(yī)師、臨床醫(yī)師、病理醫(yī)師、病理技術(shù)員、病理學(xué)教師、細胞學(xué)醫(yī)師、檢驗科醫(yī)師、規(guī)培學(xué)員、在校醫(yī)學(xué)生、患者、健康人群。
 
 
 
人乳頭瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染是下生殖道諸多類型癌的必要因素:幾乎所有的宮頸鱗癌都是由于HPV感染所致,而外陰、陰道及陰莖的癌則有40%左右為HPV感染所致。盡管下生殖道HPV相關(guān)鱗狀上皮腫瘤性病變在病因方面有一定共同性,且形態(tài)學(xué)也有相似之處,但目前病理醫(yī)師、婦科醫(yī)師、皮膚科醫(yī)師之間對這類病變的分類卻仍未取得一致。
 
美國病理醫(yī)師學(xué)會(College of American Pathologists,CAP)、美國陰道鏡及宮頸病理學(xué)會(American Society for Colposcopy and Cervical Pathology)曾聯(lián)合提出過一個下生殖道鱗狀上皮病變術(shù)語(Lower Anogenital Squamous Terminology,LAST)方案,具體包括:
1.    對于下生殖道所有的非浸潤性、HPV相關(guān)的鱗狀上皮腫瘤性病變都采取統(tǒng)一的二級分類,根據(jù)部位進一步確定相應(yīng)的上皮內(nèi)病變(intraepithelial neoplasia,-IN)名稱;
2.    免疫組化p16的應(yīng)用標準及解讀;
3.    采用表淺浸潤性鱗狀細胞癌(suoerficially invasive squamous cell carcinoma,SISCCA)的名稱;這是一類可以采取相對保守治療的微小浸潤性癌,根據(jù)不同的解剖部位會有不同的診斷標準。
 
對于宮頸而言,HPV感染是幾乎所有鱗狀上皮腫瘤性病變的必要條件、但卻不是充分條件。HPV與鱗狀上皮之間的關(guān)系可以簡單的分為下述兩種主要情況:
1.  一過性感染
這種情況組織學(xué)上對應(yīng)低級別鱗狀上皮內(nèi)病變(low-garde squamous intraepithelial lesion,LSIL),臨床上具有較高的緩解率。
2.  持續(xù)性感染
這種情況是指病毒基因組整合到鱗狀上皮并出現(xiàn)致癌基因E6、E7的表達,從而促進DNA損傷的蓄積、本應(yīng)發(fā)生阻滯的細胞周期因p53和Rb蛋白的調(diào)節(jié)異常而繼續(xù)進展。組織學(xué)上對應(yīng)高級別鱗狀上皮內(nèi)病變(high-garde squamous intraepithelial lesion,HSIL);臨床上轉(zhuǎn)化為癌的風(fēng)險相對高。
 
低級別鱗狀上皮內(nèi)病變
大體特征
宮頸檢查多為陰道鏡下、或直視下對大體表現(xiàn)顯著異常區(qū)域進行活檢,移行帶是觀察的重點,因為宮頸癌前病變及癌大部分都發(fā)生在這一區(qū)域,即鱗柱狀交界區(qū)域。陰道鏡檢查時,有LSIL病變的黏膜由于細胞核漿比增加、表皮厚度增加,所以白光檢查時白光反射增強而血管透射的紅光反射降低,移行帶表現(xiàn)相對較白。3-5%的醋酸會使得細胞短暫性腫脹,因此核漿比增加、及有其他異常的細胞其上皮的白化現(xiàn)象加重且持續(xù)。
 
陰道鏡下應(yīng)注意的指標有:上皮顏色、血管模式、表面形狀、邊緣處特征。LSIL一般表現(xiàn)為醋酸涂布后呈淡白色(略呈半透明狀),很難與不成熟化生鑒別。邊界明顯不規(guī)則、呈地圖樣,血管顯著,這兩點可能有助于LSIL和化生鑒別。
 
鏡下特征
細胞學(xué)方面,病變細胞核增大(大于正常中間層細胞核的3倍),細胞核大小差距顯著(anisonucleosis),細胞核輪廓不規(guī)則,染色質(zhì)粗糙、深染,胞質(zhì)豐富、致密(因此核漿比低),可見雙核或多核,可見挖空細胞(即細胞核周邊有一圈空暈,而周邊為致密深染的胞質(zhì))。不滿足LSIL診斷標準的情況下,可以歸為意義不明的非典型鱗狀細胞(atypical squamous cells of undetermined significance,ASC-US)

組織學(xué)上,鱗狀上皮出現(xiàn)棘層肥厚、表層出現(xiàn)細胞學(xué)異型性。低倍鏡下即可見細胞核排列雜亂;高倍鏡下細胞核大小差距顯著,深染,染色質(zhì)粗糙,偶有雙核或多核,并可見類似于細胞學(xué)中表現(xiàn)的挖空細胞。這些細胞學(xué)改變在受累成熟鱗狀上皮的表淺處最為顯著,在不成熟鱗狀上皮化生處則不太顯著?;讓涌奢p度增厚(局限于表皮下1/3),但一般仍均勻排列且僅有輕度細胞學(xué)異型性。核分裂一般局限于基底。病變可以扁平,也可呈外生性(尖銳濕疣)。

圖1. LSIL鏡下表現(xiàn)。
 
鑒別診斷
1.    具有相似表現(xiàn)的反應(yīng)性改變
正常成熟鱗狀上皮中的糖原、反應(yīng)性鱗狀上皮中小而境界不清的核旁空泡均可類似挖空細胞改變。如果低倍鏡下核旁胞質(zhì)顯著透明、細胞核異型性需高倍鏡下證實,則診斷為LSIL;如果僅有核旁空暈而無細胞核異型性,則不足以診斷為LSIL。盡管LSIL中細胞核異型性較輕的情況下可能會與反應(yīng)性改變中細胞核異型性較重的情況有所重疊,但細胞核顯著大小不一(而不是均一增大)、細胞核排列紊亂(而不是均一排列)有助于和反應(yīng)性改變所致低級別非典型增生(dysplastic)的鑒別。重度炎癥背景下,細胞核具有輕度異型性,則傾向于反應(yīng)性改變。尤其有重度炎癥及潰瘍的情況下,也要考慮并排除單純皰疹病毒及巨細胞病毒所致細胞學(xué)改變,前者如多核、染色質(zhì)邊集、核呈鑄型樣,后者如細胞增大、出現(xiàn)呈孤兒眼樣核內(nèi)包涵體。

圖2. 鱗狀細胞內(nèi)顯著的糖原。
 
2.    HSIL
前述LAST方案中,建議將細胞學(xué)具有顯著異型性的LSIL樣病變、或具有非典型核分裂的LSIL樣病變歸為HSIL。這方面相關(guān)文獻并不多,但Park等人的研究發(fā)現(xiàn)細胞學(xué)具有顯著異型性(如有5個或以上的細胞其細胞核增大至中間層細胞核的5倍以上,或出現(xiàn)5個或以上細胞核的多核細胞)的LSIL可能進展為HSIL的幾率更高。相反,也有人發(fā)現(xiàn)LSIL中有無顯著細胞學(xué)異型性對于進展為HSIL來說并無區(qū)別。鑒于:(1)目前尚無充分證據(jù)表明伴顯著細胞學(xué)異型性的LSIL具有進展?jié)撃?;?)異型性分類固有的主觀性,可能會導(dǎo)致相關(guān)問題的可重復(fù)性差;(3)診斷為LSIL的患者會加強隨訪,因此本文作者建議對于這種情況還是診斷為LSIL而防止過度治療。LSIL與HSIL的主要鑒別點在于鱗狀上皮的成熟,因此累及不成熟化生區(qū)域的LSIL可能會由于鱗狀上皮缺乏顯著成熟表現(xiàn)而類似HSIL。

圖3. 伴顯著異型性的LSIL。

圖4. LSIL累及化生區(qū)域。
 
診斷要點
LSIL的診斷取決于HE染色切片中的形態(tài)學(xué)表現(xiàn)。LAST方案尤其不贊同在LSIL診斷中采用p16免疫組化,因為這種情況下可以出現(xiàn)點狀、斑片狀陽性或完全陰性,并且形態(tài)學(xué)為LSIL的前提下p16免疫組化對于預(yù)后并無預(yù)測意義。因此并不能因為p16陰性(或者斑片狀陽性、完全陰性等)而將相關(guān)病變降級為陰性或反應(yīng)性,也不能因為p16陽性(細胞核及細胞質(zhì)彌漫、強陽性,點狀陽性)而將相關(guān)病變升級為HSIL。
 
預(yù)后
相比宮頸HSIL來說,LSIL大部分(60%)會自發(fā)消退,小部分(30%)會持續(xù)感染及進展(10%進展為HSIL,1%進展為浸潤性癌)。與這一情況相對應(yīng),細胞學(xué)和/或組織學(xué)診斷為LSIL者一般僅加強隨訪力度即可,無需診斷性手術(shù)切除。
 
Take-home message
生物學(xué):HPV一過性感染,消退幾率高;
形態(tài)學(xué):低倍鏡下黏膜增厚,細胞核排列不規(guī)則,增大、深染,表層細胞可見胞質(zhì)內(nèi)空暈,鱗狀上皮下1/3無明顯成熟現(xiàn)象,核分裂一般局限于下層。高倍鏡下細胞核增大,染色質(zhì)粗糙,細胞核輪廓不規(guī)則,可見雙核,細胞核旁有顯著空暈(挖空細胞)。
 
 
未完待續(xù)
 
參考文獻
Human Papilloma Virus-Associated Squamous Neoplasia of the Lower Anogenital Tract[J].Surgical pathology clinics,2019,12(2):263-279.
DOI:10.1016/j.path.2019.02.001

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