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嗚嗚~~ 我被小白鼠咬了?。?!誰能告訴我怎么抓小鼠?
導(dǎo)語
與小白鼠相生相殺的日子,被咬傷出血真是一件很讓人抓狂的事,不只是影響著身體健康。所謂一朝被蛇咬,十年怕井繩,心里的恐懼還會(huì)延誤我們的課題,關(guān)乎著畢業(yè)。不懂人情世故的小編也難逃此劫,回看過去幾篇文章,其實(shí)小鼠性情溫順還挺可愛的,原來它咬傷我,在于我還不懂她……

因此,在日常實(shí)驗(yàn)中,我們應(yīng)該讀懂小鼠,站在小鼠的角度理解她,在不使她產(chǎn)生痛苦、符合生理特性、減少應(yīng)激的基礎(chǔ)上操作,就會(huì)避免很多不必要的麻煩。下面咱們就從最基礎(chǔ)也最重要的小鼠抓取與固定說起,給大家介紹一下在小鼠實(shí)驗(yàn)中最常接觸到的幾種實(shí)用技能(小鼠的抓取與固定;給藥方式),助你以后的實(shí)驗(yàn)得心應(yīng)手起來!

一、抓取與固定 

很多實(shí)驗(yàn)如小鼠給藥,采血等,均需要將小鼠固定住才可進(jìn)行操作,因此規(guī)范準(zhǔn)確地抓取動(dòng)物是實(shí)驗(yàn)的前提,既能避免動(dòng)物咬人,也更便于我們實(shí)驗(yàn)操作。對(duì)于一般簡(jiǎn)單實(shí)驗(yàn),雙手就是最好的固定的工具。

1. 抓取步驟

① 右手提起小鼠尾巴,將其放在鼠籠蓋或其他粗糙表面上

② 小鼠向前掙扎爬行時(shí),再用左手拇指和食指抓住鼠耳和頸部皮膚(如下圖)

③ 小鼠于左手心中后,用左手的無名指和小指夾其背部皮膚和尾部(如下圖)

應(yīng)用:一些簡(jiǎn)單的操作如小鼠灌胃、皮下注射、腹腔注射、肌內(nèi)注射、剪毛等

注意

①小鼠體型雖小但非常靈活,抓取時(shí)避免咬傷一定要又穩(wěn)又準(zhǔn)

② 抓尾巴時(shí),應(yīng)抓取小鼠尾巴的中部或根部,捏住尾端可能損傷小鼠

③ 由于小鼠一直在活動(dòng),一次沒抓好時(shí)要放開重新抓,不要急于下一步操作

2. 固定

進(jìn)行解剖、手術(shù)、心臟采血和尾靜脈注射等操作時(shí)(必要時(shí)先行麻醉),需做一定形式的固定。如尾靜脈注射或采血時(shí):如下圖為小鼠固定器和尾靜脈注射。

第一步:打開尾蓋,手提起小鼠尾巴,讓動(dòng)物頭對(duì)準(zhǔn)鼠筒口并使其本能的爬入固定器內(nèi);

第二步:調(diào)節(jié)小鼠固定器的長(zhǎng)短,留出尾巴即可進(jìn)行操作。

小鼠固定器

尾靜脈注射的小鼠固定

如果需要解剖或者心臟注射時(shí):

① 麻醉小鼠

② 處于背臥式后再用大頭針(或者固定膠布)將鼠前后肢依次固定在蠟板上再進(jìn)行操作。

應(yīng)用: 對(duì)小鼠的解剖、手術(shù)和心臟采血等操作

二、小鼠常用給藥方法  

進(jìn)行藥物治療時(shí),為了達(dá)到安全合理用藥,必須根據(jù)治療目的選擇適當(dāng)?shù)慕o藥途徑。接下來介紹一下常用到的小鼠給藥途徑的操作方式及各自特點(diǎn)。

因藥物性質(zhì)和給藥目的不同,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中大概分為以下三種給藥方式:

1. 小鼠自動(dòng)攝入 

2. 灌胃

3. 注射給藥(皮內(nèi)注射、皮下注射、肌肉注射、腹腔注射、靜脈注射、腦內(nèi)注射等)

1. 小鼠自動(dòng)攝入 

一般是將藥物摻入飼料或者飲水中,使動(dòng)物自動(dòng)攝入

優(yōu)點(diǎn):操作簡(jiǎn)單方便

缺點(diǎn):劑量不能準(zhǔn)確掌握,且動(dòng)物個(gè)體間服藥量差異較大

2. 灌胃

藥物經(jīng)口腔、食管直接送入胃中,要經(jīng)過消化過程才能進(jìn)入體循環(huán),再到血液發(fā)揮作用。多用于急性試驗(yàn)中的經(jīng)口給藥法

操作方法

①抓取小鼠,頭部向上,頭向后仰使口腔和食管呈直線

②右手持注射器(一般用1ml的注射器配灌胃針頭),從一側(cè)口角進(jìn)針,沿著上顎推至后頭,以針頭輕壓舌根

③灌胃針前端順利進(jìn)入食管后,緩慢推進(jìn),插入針時(shí)應(yīng)無阻力;

若感到阻力或動(dòng)物掙扎時(shí),應(yīng)立即停止進(jìn)針或?qū)⑨槹纬?/p>

參考給藥量:小鼠0.1ml/10g體重,最大不超過0.5ml/10g體重

優(yōu)點(diǎn):劑量準(zhǔn)確,是常用,比較安全、方便經(jīng)濟(jì)的給藥方法,

缺點(diǎn):吸收不恒定,誤差較大。如某些藥物因本身的被物理性質(zhì)而不能吸收;

有些藥物對(duì)胃粘膜有刺激作用可引起嘔吐;藥物與食物同時(shí)存在時(shí),吸收會(huì)有影響

3. 注射給藥(通過注射的方式,使藥物吸收)

優(yōu)點(diǎn):劑量準(zhǔn)確,作用快,是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中常用的給藥方法

缺點(diǎn):操作比較復(fù)雜,安全性較低、風(fēng)險(xiǎn)較大

根據(jù)注射位置分為多種注射方式。為了便于理解,首先了解一下皮膚構(gòu)造,

如下圖:依次是表皮、真皮、皮下組織和肌肉層。

注射給藥中,根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,主要分為以下幾種:

1. 皮內(nèi)注射

將藥物注射于表皮與真皮之間(結(jié)合上圖),緊貼皮膚表層刺入皮內(nèi),針頭與皮膚呈10-15°角先刺入皮下,針頭向上挑起進(jìn)入皮內(nèi)再稍刺入,推出藥夜,見皮膚表面鼓起小皮丘,若皮丘不很快消失,證明藥液在皮內(nèi)。一般選擇小鼠背部脊柱兩側(cè)皮膚進(jìn)行注射

特點(diǎn):適用于皮膚過敏試驗(yàn),觀察皮膚反應(yīng)

參考給藥量:小鼠每次每點(diǎn)不超過0.05ml,兩點(diǎn)間隔1cm以上

2. 皮下注射

將藥物注射于皮下,提起注射部位皮膚使皮下形成空隙,將注射針沿皮膚推進(jìn)5-10mm,若針頭可輕松左右擺動(dòng),表明針頭在皮下,輕輕抽吸無回流物,則可注入藥物,拔出針后應(yīng)按壓針刺部位,防止藥液外漏和促進(jìn)藥物吸收,一般選擇小鼠的背部

特點(diǎn):皮下注射的吸收速率通常均勻而緩慢,因而作用持久;僅適用于對(duì)組織無刺激性的藥物,否則可引起劇烈疼痛和組織壞死

參考給藥量:小鼠0.1~0.3ml/10g體重

3. 肌肉注射

將針頭刺入大腿外側(cè)肌肉,注射時(shí)垂直迅速刺入肌肉,回抽針?biāo)ㄈ鐭o回血,將藥物注入。一般選肌肉發(fā)達(dá),無大血管通過的部位,多選臀部

特點(diǎn):藥物水溶液肌肉注射時(shí)吸收十分迅速,適用于油溶液和某些刺激性物質(zhì)

參考給藥量:小鼠給藥量每次小于0.05-0.1ml

4. 腹腔注射

抓取小鼠,使其腹部朝上頭部略向下垂,抓緊背部皮膚使使腹部皮膚緊繃,于腹中線一側(cè)刺入皮下,在皮下平行腹中線推進(jìn)針頭3-5mm,再以45°角向腹腔內(nèi)刺入,當(dāng)針尖通過腹肌后,抵抗力消失,回抽無回流物,緩慢推入藥物。

特點(diǎn):是很常見的給藥方式,注射劑量大,注射后腹膜能力吸收強(qiáng);尤其是在麻醉時(shí),最常見的麻醉方法就是麻醉藥物腹腔注射

參考給藥量:每次給藥量小鼠0.2-0.8ml

5. 靜脈注射

小鼠一般采取尾靜脈注射方式,鼠尾靜脈有三根,左右兩側(cè)及背側(cè)各一根,一般選擇左右兩側(cè)尾靜脈,先距尾尖1/3處先緩注少量藥液,如無阻力,表示針頭已進(jìn)入靜脈,可繼續(xù)注入。

特點(diǎn):將藥物直接輸入血液,沒有消化過程,藥物直接到達(dá)循環(huán)系統(tǒng),藥效迅速可靠。但由于高濃度的藥物迅速到達(dá)血漿和組織,增加了發(fā)生不良反應(yīng)的危險(xiǎn)性。反復(fù)注射還有賴于持續(xù)保持靜脈通暢。不適用于油溶液或不溶性物質(zhì)。

參考給藥量:0.05ml - 0.1ml/10g

6. 腦內(nèi)注射

一手拇指和食指抓住動(dòng)物兩耳后的頭皮固定頭部,使注射針頭和額頂顱骨呈45°角,在中線外側(cè)2mm處刺入,注射速度一定要慢,避免引起顱內(nèi)壓急遽升高

特點(diǎn):多在微生物學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

參考給藥量:每次低于0.03ml

7. 其他注射

除了上述常見的幾種注射給藥方式外,根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,還有其他注射方式,如心室注射等,這里就不在贅述了。

小鼠的固定不僅僅是為了避免我們被咬傷,更是很多實(shí)驗(yàn)操作成功的前提,所以我們一定要熟練掌握。另外,在小鼠的各種給藥方式中尾靜脈注射難度是最大的,相信困擾了很多人,下一期我們將為大家詳細(xì)介紹尾靜脈注射秘訣,并附上最全面最專業(yè)的視頻教材,一定不要錯(cuò)過哦!

精彩內(nèi)容列表(持續(xù)更新)

模式動(dòng)物系列(—)小鼠基本信息

1.1 常見大小鼠品系

1.2 如何進(jìn)行小鼠科學(xué)地飼養(yǎng)

1.3 小鼠的一生及繁育過程

1.4 ICR小鼠絕美寫真

1.5 小鼠隔離與凈化

1.6 常見小鼠實(shí)驗(yàn)操作技能(小鼠的抓取與固定、給藥方式等)

2. 模式動(dòng)物系列(二)基因編輯鼠

2.1  基因編輯鼠的構(gòu)建

2.2  gRNA設(shè)計(jì)和篩選

2.3  sgRNA表達(dá)載體構(gòu)建

2.4  顯微注射操作步驟及要點(diǎn)

2.5  小鼠培育及繁殖過程

2.6  小鼠基因型鑒定

2.7  小鼠保種方式(精子、胚胎凍存)

2.8  小鼠體外受精介紹

3. 模式動(dòng)物系列(三)疾病動(dòng)物模型

3.1 疾病動(dòng)物模型基本介紹

3.2 免疫缺陷動(dòng)物

3.3 人源化動(dòng)物

3.4 腫瘤動(dòng)物模型介紹

3.5 腫瘤模型之生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)模型

3.6 免疫療法相關(guān)腫瘤模型介紹

4.  實(shí)踐中的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利和倫理

4.1 Nature論文險(xiǎn)被撤稿,你的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)合乎動(dòng)物福利和倫理嗎?

5. 小鼠命名規(guī)則

5.1 常見小鼠命名規(guī)則

5.2 基因工程鼠命名規(guī)則(上)——定點(diǎn)突變小鼠

5.3 基因工程鼠命名規(guī)則(下)——轉(zhuǎn)基因小鼠

6. 代謝綜合征動(dòng)物模型

6.1 糖尿病動(dòng)物模型綜述

6.2 1型糖尿病動(dòng)物模型介紹

6.3 2型糖尿病動(dòng)物模型介紹

7.1 肝損傷動(dòng)物模型介紹

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