簡(jiǎn)介
重組蛋白表達(dá)是指細(xì)胞把儲(chǔ)存在DNA序列中遺傳信息經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)錄和翻譯，最終轉(zhuǎn)變成具有生物活性的蛋白質(zhì)分子。
分泌表達(dá)至細(xì)胞外
優(yōu)點(diǎn)
增強(qiáng)正確二硫鍵的形成
降低蛋白酶對(duì)表達(dá)蛋白的降解
可獲得確定的N末端
顯著減少雜蛋白水平，簡(jiǎn)化純化
不需要細(xì)胞破碎
缺點(diǎn)
多數(shù)蛋白不能進(jìn)行分泌表達(dá)
分泌表達(dá)蛋白濃度低需要進(jìn)行濃縮
細(xì)胞周質(zhì)空間表達(dá)
優(yōu)點(diǎn)
增強(qiáng)正確二硫鍵的形成
可獲得確定的N末端
顯著減少雜蛋白水平，簡(jiǎn)化純化
缺點(diǎn)
一些蛋白不能分泌進(jìn)入周質(zhì)空間
沒(méi)有大規(guī)模選擇性的釋放周質(zhì)空間蛋白的技術(shù)
周質(zhì)蛋白酶可引起重組蛋白酶解
胞內(nèi)包涵體表達(dá)
優(yōu)點(diǎn)
包涵體易于分離
保護(hù)蛋白質(zhì)不被降解
蛋白質(zhì)不具有活性對(duì)宿主細(xì)胞生長(zhǎng)沒(méi)有大的影響，通?？色@得高的表達(dá)水平
缺點(diǎn)
需要體外的折疊和溶解，得率較低
具有不確定N末端
胞內(nèi)可溶表達(dá)
優(yōu)點(diǎn)
不需要體外溶解和折疊
一般具有正確的結(jié)構(gòu)和功能
缺點(diǎn)
高水平的表達(dá)常難以得到
需要復(fù)雜的純化
可發(fā)生蛋白質(zhì)的酶解
具有不確定的N末端
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