歷史唯物主義者昨天 14:25
反轉(zhuǎn)的人不看論文就敢開口也是領(lǐng)教了，雖然論文要花錢，到好歹摘要可以讀讀吧?；蛘呤枪室鈦眚_人的？
CRISPR-Cas9是一種多功能的rna引導(dǎo)的基因組編輯工具。
在這里，我們證明了在CRISPR RNA (crRNA)中用DNA核苷酸部分替換RNA核苷酸可以在人類細(xì)胞中實現(xiàn)有效的基因編輯。當(dāng)同時使用crRNA和sgRNA以及多個引導(dǎo)序列時，這種部分DNA替換策略可以保持目標(biāo)活性。部分DNA置換也適用于另一個CRISPR系統(tǒng)Cpf1的crRNA。
我們發(fā)現(xiàn)，通過對離靶點裂解的聚焦分析、錯配耐受性的測量以及對離靶點的全基因組譜分析，引導(dǎo)序列中的部分DNA置換顯著減少了離靶點基因組的編輯。以Cas9-sgRNA復(fù)合物的結(jié)構(gòu)為指導(dǎo)，crRNA的3 '端大部分可以被DNA核苷酸取代，而5 '和3 ' -DNA取代的crRNA可以實現(xiàn)高效的基因組編輯。
Cas9在DNA-RNA嵌合體的引導(dǎo)下，可以提供一種通用的策略來降低人類細(xì)胞和非目標(biāo)基因組編輯的成本。
