前僅能夠在小鼠實(shí)驗(yàn)中常規(guī)培養(yǎng)用于基因打靶的ES細(xì)胞，大鼠的ES細(xì)胞已獲得成功，但還沒有得到廣泛的應(yīng)用。目前在許多其他物種中尚缺乏穩(wěn)定的ES細(xì)胞系，難以利用ES細(xì)胞進(jìn)行基因打靶；只能通過體細(xì)胞(somatic cell)進(jìn)行基因修飾，然后用體細(xì)胞核移植(nuclear transfer)技術(shù)獲得基因修飾動(dòng)物。Briggs和King首先通過核移植技術(shù)進(jìn)行克隆動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)，隨后Gurdon報(bào)道在爪蟾上獲得成功。最近，動(dòng)物克隆技術(shù)已經(jīng)被成功地用于克隆小鼠、大鼠、豬、貓科動(dòng)物以及家畜。
動(dòng)物克隆(clone)技術(shù)可用于產(chǎn)生基因修飾動(dòng)物，其原理為：首先培養(yǎng)體細(xì)胞如成纖維細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞基因組進(jìn)行基因修飾，如轉(zhuǎn)基因和基因打靶；然后將成纖維細(xì)胞的體細(xì)胞核移植入去核的卵母細(xì)胞。第二次減數(shù)分裂中期(second meiotic metaphase)，卵母細(xì)胞作受體，由于減二中期細(xì)胞核的位置靠近第一極體，用微型吸管可以一并吸出細(xì)胞核和第一極體。通過病毒膜糖蛋白誘導(dǎo)的細(xì)胞融合(inactivated Sendai virus)或電融合來完成核移植，亦可以通過Piezo壓電式顯微操作儀用平口的玻璃針直接將體細(xì)胞核注入去核的卵母細(xì)胞。接著將核移植的卵母細(xì)胞體外激活，產(chǎn)生的克隆胚胎轉(zhuǎn)移到一個(gè)假孕動(dòng)物中，克隆胚胎在代孕母親中發(fā)育成一個(gè)植入的囊胚，最終發(fā)育產(chǎn)生克隆動(dòng)物。
盡管大動(dòng)物體細(xì)胞基因打靶效率較低，開展基因敲除較困難，但與體細(xì)胞核移植相結(jié)合的基因打靶已經(jīng)被成功地運(yùn)用于生產(chǎn)基因敲除羊、豬和牛。核移植已用于制備老年癡呆疾病轉(zhuǎn)基因豬模型，這個(gè)模型表達(dá)人類的APP基因，帶有老年癡呆疾病相關(guān)的典型突變。
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