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實驗技術(shù)篇|小鼠尾靜脈注射視頻和技巧分享
近年來,以PD1/PD-L1單抗為代表的大分子抗體類藥物和以CAR-T 為代表的細(xì)胞治療藥物成為了藥物研發(fā)的熱點,也成了業(yè)界精英們茶前飯后討論的主題。這類臨床試驗的成功為免疫領(lǐng)域科學(xué)家們打開了期待已久的“希望之窗”,讓人們革新了對免疫系統(tǒng)重建“堡壘”重要性的認(rèn)知。除此之外,小分子靶向藥物、大分子抗體藥物、化療藥物的“兩兩組合方案”也是提高臨床藥效的熱門方案,受到藥物研發(fā)科學(xué)家們的強(qiáng)烈追捧。比如,這幾天“上了火”的百濟(jì)神州BTK抑制劑澤步替尼(Zanubrutinib)單藥被被批準(zhǔn)治療至少一次治療的套細(xì)胞淋巴瘤(非霍奇金淋巴瘤的一個小的病理亞類),而在第15屆國際惡性淋巴瘤大會(ICML)公布Ib期結(jié)果,Zanubrutinib在臨床試驗聯(lián)合obinutuzumab(羅氏,CD20單抗)在CLL/SLL(慢性淋巴細(xì)胞白血病/小淋巴細(xì)胞淋巴瘤)和FL(濾泡性淋巴瘤)上 ORR分別是96%和72%,遠(yuǎn)超單藥(此文不詳述研究結(jié)果,后續(xù)全面總結(jié)呈現(xiàn))。

     在這樣的醫(yī)藥研發(fā)大背景下,作為從事基礎(chǔ)科研和藥物研究的一線工作者,該如何學(xué)習(xí)本領(lǐng)、掌握好IV注射技術(shù)來配合和支持這些方案的落地執(zhí)行呢?本文將分享一篇小白鼠的尾靜脈注射技巧,以饗從事藥理研究的一線研發(fā)技術(shù)人員,讓IV藥物注射不是只停留在“能做”,而是要“做的好,做的快,做的順利,做的精準(zhǔn)高效”

視頻一

尾靜脈注射步驟(實用經(jīng)驗字字原創(chuàng)總結(jié),沒有一點水分,都是晾干的干貨):

1 把小鼠使用購買的專用固定器固定,或者50ml自制離心管,或直接放在籠子上,尾巴從籠縫里出來,用左手拉著(本視頻即是,這樣省去固定的時間,簡單快捷,建議使用)(只要不影響小鼠的正常狀態(tài),便于快速順利注射,方法選擇適合自己的也OK!)。

2 使用酒精擦拭要注射的一側(cè)尾靜脈,(兩側(cè)是靜脈,中間的是動脈),使得血管充盈,(一般小鼠兩側(cè)不一樣,觀察后選擇相對血液充盈的一側(cè)進(jìn)行注射)

3 選擇0.4mm或0.45mm的針頭和1ml注射器,調(diào)整好針尖斜面和注射器刻度,使得進(jìn)針推入時能方便看到注射的刻度(要是小鼠做流體動力學(xué)注射質(zhì)粒溶液,實現(xiàn)基因體內(nèi)過表達(dá),選擇0.5mm的針頭,2.5ml注射器,大體積(如2ml體積)3-5秒內(nèi)需要打進(jìn)去,后續(xù)我會視頻演示)

4 進(jìn)針,針斜面口向上,針尖刺入后,平行進(jìn)針,即只要針尖不出來,控制針尖在皮下推進(jìn),距離表皮能多薄就多薄,針身在血管里推行清晰可見且柔滑時基本就進(jìn)去了(如視頻中,來回推針身,透過尾巴皮膚很清晰,正式做時不要來回推了,一針進(jìn)去直接推液體,本視頻僅供看技巧)

5 推針,推針時千萬注意小鼠尾巴,不彎曲,不隨意亂動,即左手把小鼠尾巴向后面拽住,不能松動。推入一定的體積即可。

  注: 關(guān)于大鼠、裸鼠、黑鼠的尾靜脈高效注射方法各有不同,后續(xù)會分享,歡迎保持關(guān)注和資源分享!

成功的關(guān)鍵要點:

1 擦拭酒精的棉球要濕潤 ,不要連點濕潤都沒有了。起碼擦上去,尾巴有點濕漉漉的,能刺激起血管的膨脹充盈。不然你就等著掛吧!有時能打進(jìn)去,有時打不進(jìn)去的。還不如不打呢,老鼠全報銷了。   

2 擦拭尾巴,也要稍微用點力氣,別蜻蜓點水的擦拭就行,從尾巴根部擦到尾巴尖端部位,擦幾次,一是為了清晰,二是增加整條血管的充盈程度,尤其對于血管癟的小鼠,很重要。

3 針推進(jìn)時距離表皮越薄越有可能是在血管里。一般進(jìn)針失敗的不是進(jìn)偏了,基本都是進(jìn)深了。表皮擦拭后非常薄,盡可能薄就行了。

4 注射器的抓法很重要,進(jìn)針后還要準(zhǔn)備推入,這時候可能要換成推入的一個動作。不少注射都是抓法不合適,準(zhǔn)備推入時,針尖移動出來了,就掛了!至于這個抓法,有不同的方式,熟悉了掌握了就可以了。(視頻中這個抓法是沒有進(jìn)針推針換動作的抓法(未展示),右手食指和中指夾住注射器的后端就可以,需要反復(fù)練習(xí)才行,不然這兩個手指根本使不上穩(wěn)定的夾勁)。

視頻二

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