免费视频淫片aa毛片_日韩高清在线亚洲专区vr_日韩大片免费观看视频播放_亚洲欧美国产精品完整版

Trizol/TriPure 試劑適用于從不同的生物樣本(包括人類、動(dòng)物、植物、酵母、細(xì)菌和病毒來(lái)源的樣本) 中分離總 RNA 或同時(shí)分離RNA、DNA 和蛋白質(zhì)。

氯仿，異丙醇，75%乙醇（DEPC 水），無(wú) RNase 水或 0.5%SDS, 12000g 高速離心機(jī)，聚丙烯離心管，水?。?5-60 度），*密度梯度離心試劑（用于白血細(xì)胞提?。?糖原（用于小于10mg 的組織樣本）

根據(jù)樣品類型的不同，按下表在室溫下完成勻漿裂解操作；樣品體積不能超過(guò)Tripure試劑的10％；同時(shí)，按建議體積量加入Tripure試劑，保證充分裂解，避免DNA污染。

對(duì)高脂肪、蛋白、多糖 、胞外基質(zhì)的樣品（例如肌肉，脂肪，塊莖類植物等）， 需要額外步驟去除不溶性成份。（如果后續(xù)還要提取DNA，則省略該步驟）

在此，可以繼續(xù)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，或?qū)驖{樣品在-80度保存（一月以上）。

1、 勻漿樣品在室溫下放置5min，使核蛋白復(fù)合體充分分解。

2、每1ml Tripure勻漿液中加入0.2ml氯仿，蓋緊離心管。

3、手動(dòng)劇烈搖蕩離心管15s。

4、室溫下放置2-15min。

5、4度12000g 離心樣品15min。

6、離心后勻漿液分層，最上層是無(wú)色的水相，RNA主要分布在其中，約占總體積的50%。

7、傾斜離心管45度，小心吸取上層水相至新的離心管，避免吸取其他各相液體。

8、如果要分離DNA和蛋白，保留剩余液體；有機(jī)相可以在4度過(guò)夜保存。

1、對(duì)小量提取的RNA（小于約10^6細(xì)胞，或10mg組織），添加入5-10ug 無(wú)RNase 的糖原作為共沉淀的載體。

2、每1ml Tripure勻漿樣品，加入0.5ml異丙醇到離心管。

3、室溫放置10min。

4、4度12000g 離心樣品10min。

1、輕輕吸取上清，加1ml 75%乙醇/1ml Tripure勻漿樣品到離心管。

2、在此, RNA可以-20度保存一年以上。

3、稍微渦旋離心管，4度7500g 離心樣品5min。

4、去上清，真空或敞口干燥RNA 5-10min；避免過(guò)分干燥。

1、加入20-25ul無(wú)RNase的水或0.5%SDS溶液重溶RNA沉淀。

2、槍頭吹打溶液，之后放入55-60度水浴中10-15min。

3、-80度長(zhǎng)期保存或進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

測(cè)定A260nm數(shù)值，以公式 A260×稀釋倍數(shù)×40= ug RNA/ml 計(jì)算RNA含量，以A260nm和A280nm比值確定RNA的純度。