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教你如何簡(jiǎn)便進(jìn)行轉(zhuǎn)錄因子(TF)預(yù)測(cè)

高通量測(cè)序火了不止一年兩年,很多時(shí)候我們都是先找到自己心儀的相關(guān)基因,然后進(jìn)行下游靶基因的驗(yàn)證。其實(shí),我們還可以往上游做,以豐富機(jī)制研究的深度,也就是查找基因的啟動(dòng)子以及轉(zhuǎn)錄因子預(yù)測(cè)。今天,我們就來嘮嘮轉(zhuǎn)錄因子預(yù)測(cè)分析吧~

轉(zhuǎn)錄因子也稱反式作用因子,在動(dòng)植物的生長(zhǎng)發(fā)育及其對(duì)外界環(huán)境的反應(yīng)中起著重要的調(diào)控作用,已成為現(xiàn)在生物學(xué)研究領(lǐng)域的熱點(diǎn),其功能分析是重要的研究?jī)?nèi)容之一。因此我們可以通過轉(zhuǎn)錄因子注釋,或者可通過表達(dá)量聚類分析,篩選出關(guān)注生物學(xué)問題過程中起主要調(diào)控作用的一些轉(zhuǎn)錄因子。并且可以結(jié)合WGCNA鑒定的基因模塊,篩選關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子在基因模塊中是否為hub gene,并通過預(yù)測(cè)轉(zhuǎn)錄因子的靶基因(MEME),篩選出基因模塊中的靶基因,建立以轉(zhuǎn)錄因子為hub gene的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。

轉(zhuǎn)錄因子相關(guān)的文章有很多,例如2015年發(fā)表在Proc Natl Acad Sci的一篇文章,作者通過玉米種子吸水膨脹不同階段的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),鑒定玉米子葉發(fā)育各階段相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子(TF)其靶向位點(diǎn)(TFBS)。百邁客成功案例也有類似的文章,比如2016年發(fā)表在Plant Cell Physiol上的一篇文章,介紹的是異源表達(dá)DREB轉(zhuǎn)錄因子(AtDREB1A)提高轉(zhuǎn)基因丹參抗旱性的調(diào)控機(jī)制。

如何簡(jiǎn)便快捷進(jìn)行轉(zhuǎn)錄因子注釋研究呢?

同志們,福利來了~百邁客云(BMKCloud)免費(fèi)為您提供轉(zhuǎn)錄因子注釋工具,助力各位科研君進(jìn)行深度的數(shù)據(jù)挖掘!

情景一:如果您在我們公司有做項(xiàng)目,那結(jié)題報(bào)告和分析結(jié)果將會(huì)在百邁客云(BMKCloud)上進(jìn)行展示,您可在測(cè)序項(xiàng)目中直接進(jìn)行轉(zhuǎn)錄因子。

操作步驟:

登錄百邁客云首頁(www.biocloud.net)——我的項(xiàng)目——報(bào)告——基因結(jié)構(gòu)挖掘——轉(zhuǎn)錄因子預(yù)測(cè),選擇對(duì)應(yīng)數(shù)據(jù)庫(植物or動(dòng)物),點(diǎn)擊提交即可。

就是這么easy!

情形二:利用免費(fèi)小工具進(jìn)行分析。

操作步驟:

登錄百邁客云首頁(www.biocloud.net)——分析——工具

在對(duì)話框中輸入“轉(zhuǎn)錄因子注釋”,Enter鍵進(jìn)入轉(zhuǎn)錄因子注釋工具界面

這種方法操作也非常之簡(jiǎn)便,只要按照要求格式提交基因序列文件然后選擇物種即可:

 1、  Genes:基因序列文件,支持氨基酸序列或者核酸序列,必須以fa或者fasta做后綴,示例如下:

2、  DEG file:輸入基因出自的項(xiàng)目的差異表達(dá)文件,該文件第一列為Gene ID,最后一列為基因上下調(diào)信息,這兩列必須存在,沒有可以不用選擇

3、 Organism:可以只選擇研究的物種,分析速度快;也可以選擇All,基于所有物種的轉(zhuǎn)錄因子進(jìn)行比對(duì),結(jié)果信息會(huì)更全,但是分析速度會(huì)變慢。

4、  E-value 進(jìn)行blast比對(duì)設(shè)置的期望值,該值越小表示比對(duì)特異性越強(qiáng),核酸一般設(shè)置為1e-10,氨基酸一般設(shè)置為1e-5

篩選出來感興趣的轉(zhuǎn)錄因子,大家可能希望再找到它對(duì)應(yīng)的靶基因。如何預(yù)測(cè)轉(zhuǎn)錄因子靶基因也有很多方法,包括根據(jù)轉(zhuǎn)錄因子保守性或者是公共數(shù)據(jù)庫進(jìn)行預(yù)測(cè),這部分內(nèi)容后續(xù)我們將會(huì)持續(xù)報(bào)道介紹~~




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