1．小明欲從土壤中分離尿素分解菌，請回答下列問題：
(1)土壤中的有些細菌能分解尿素，是因為其能合成_________。
(2)選取土樣后進行一系列稀釋，吸取0.1 mL的106倍稀釋的菌液在滅菌板上進行____接種，采用該種接種方法的目的是___________________________。該實驗過程中，還設(shè)置了一個空白平板，空白平板可起____作用。實驗結(jié)果顯示：平板上的菌落數(shù)為123、119、130，則每毫升土樣溶液中的活菌數(shù)為____個。
(3)其他同學(xué)認為小明的實驗結(jié)果偏大，可能原因是操作出現(xiàn)錯誤。為了排除其他同學(xué)的質(zhì)疑，你給小明的建議是________。
(4)為了鑒定分離出來的菌種是否為尿素分解菌，需要在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，根據(jù)顏色是否變____來鑒定。
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【答案】（1）脲酶
(2)涂布 將聚集的細菌分散成單個細胞，從而獲得單個的菌落 對照 1.24×109
（3）選取同樣的土樣重復(fù)實驗，吸取菌液時注意充分搖勻，若兩次實驗的結(jié)果基本相同，則說明沒有出現(xiàn)操作錯誤
（4）紅
2．尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥，但不能被農(nóng)作物直接吸收，土壤中有一種好氧型細菌能把尿素分解成氨。欲從土壤中篩選出能分解尿素的細菌并予以純化計數(shù)，采用了如圖所示的基本操作流程。
請回答下列問題：
（1）有些細菌能分解尿素，有些細菌則不能，原因是前者能產(chǎn)生______________。
（2）能在該選擇培養(yǎng)基上生長的細菌______________（填“一定”或“不一定”）都能分解尿素，若在平板中加入酚紅，目的菌落出現(xiàn)的變化是_______________。
（3）篩選得到的菌落可以采用平板劃線法進一步純化,每次劃線后接種環(huán)必須____________，才能再次用于劃線。純化獲得的菌種可以保存在試管中，塞上棉塞或蓋上封口膜，不能密封，原因是_____________________。
（4）用來篩選分解尿素細菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有__________________。（答出兩點）
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【答案】（1）脲酶
（2）不一定 周圍指示劑變紅(或周圍出現(xiàn)紅圈)
（3）灼燒并冷卻 細菌有氧呼吸需要氣體流通
（4）為細菌生長提供無機營養(yǎng)，作為緩沖劑保持細胞生長過程中PH穩(wěn)定
3．微生物培養(yǎng)與分離技術(shù)是生物學(xué)中重要的實驗技術(shù)。根據(jù)有關(guān)微生物的知識，分析回答問題：
（1）培養(yǎng)基的制備需要經(jīng)過計算→稱量→溶化→ _________→倒平板，若所用培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，則應(yīng)該加入_________，熔化時需要邊加熱邊攪拌，原因是_________________________。
（2）分離純化后對細菌進行計數(shù)，一般采用__________________（方法）接種，此種方法估算值往往比實際值偏_______。
（3）微生物純化培養(yǎng)過程中，無菌操作至關(guān)重要，操作是否符合無菌要求，可以通過觀察_______________。
（4）為達到篩選土壤中分解尿素細菌的目的，平板內(nèi)的固體培養(yǎng)基應(yīng)以尿素作為唯一的________，培養(yǎng)基中加入________指示劑培養(yǎng)后，若變紅則其中含有所需細菌。
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【答案】（1）滅菌 瓊脂 防止瓊脂糊底，使燒杯破裂
（2）稀釋涂布平板法 小
（3）培養(yǎng)基上生長菌落的顏色、形狀、大小、隆起程度是否一致
（4）氮源 酚紅
4．為了從土壤中分離獲得尿素分解菌的單菌落，某同學(xué)設(shè)計了A、B兩種培養(yǎng)基其成分如下表所示。請回答下列相關(guān)問題：
項目 | 葡萄糖 | KH2PO4 | Na2HPO4 | MgSO4·7H2O | 尿素 | 瓊脂 | 水 |
培養(yǎng)基A | ＋ | ＋ | ＋ | ＋ | － | ＋ | ＋ |
培養(yǎng)基B | ＋ | ＋ | ＋ | ＋ | ＋ | － | ＋ |
注：“＋”表示有，“－”表示無
（1）培養(yǎng)基中的葡萄糖能為細菌的生長繁殖提供___________和___________，通常情況下，制備培養(yǎng)基時要根據(jù)所培養(yǎng)微生物的不同來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，其原因是______________________。
（2）據(jù)表判斷，培養(yǎng)基A___________（填“能”或“不能”）用于分離獲得尿素分解菌的單菌落，原因是___________；培養(yǎng)基B不能用于分離尿素分解菌，原因是______________________。
（3）若要統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目，可選用___________法進行計數(shù)。
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【答案】（1）能量 碳源 不同微生物生長繁殖所需的最適pH不同
（2）不能 該培養(yǎng)基缺少氮源，尿素分解菌不能獲得氮源而無法生長繁殖 該培養(yǎng)基沒有凝固劑，是液體培養(yǎng)基，不能將目的菌分散成單個細菌而無法獲得單菌落
（3）稀釋涂布平板
5．小明欲從土壤中分離尿素分解菌，請回答下列問題：
(1)分離并計數(shù)尿素分解菌時，需要配制以尿素為唯一氮源的__________ (填“固體選擇”“液體鑒別”“固體鑒別”或“液體選擇”)培養(yǎng)基。
(2)選取10g土樣后進行一系列稀釋，分別吸取0.1mL的104、105、106倍稀釋的菌液在滅菌板上進行__________接種，接種前至少要準備__________個滅菌平板。實驗結(jié)果顯示：106倍稀釋的菌液對應(yīng)平板上的菌落數(shù)為124、118、109，則每克土樣中的活菌數(shù)為________個。
(3)其他同學(xué)認為小明的實驗結(jié)果偏大，可能原因是操作出現(xiàn)錯誤。為了排除其他同學(xué)的質(zhì)疑，你給小明的建議是______________________________。
(4)為了鑒定分離出來的菌種是否為尿素分解菌，需要在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入__________，根據(jù)顏色變化判別。
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【答案】（1）固體選擇
（2）涂布 10 1.17×108
（3）選取同樣的土樣重復(fù)實驗，吸取菌液時注意充分搖勻，若兩次實驗的結(jié)果基本相同，則說明沒有出現(xiàn)操作錯誤
（4）酚紅指示劑
溫馨提示
