利用莖尖分生組織培養(yǎng)脫毒生姜苗,已成為防治病毒和提高生姜產(chǎn)量及品質(zhì)的主要方法。脫病毒生姜生長(zhǎng)快、長(zhǎng)勢(shì)旺、抗病、耐高溫、抗逆境能力顯著增強(qiáng),姜塊色澤鮮亮、均勻整齊、辣味濃、品質(zhì)明顯改善,同時(shí)能大幅度提高產(chǎn)量,在生產(chǎn)上脫毒姜種比原品種增產(chǎn)50%以上,增產(chǎn)效益十分顯著。
1、生姜脫病毒
植物脫毒一般采用熱處理培養(yǎng):即在35～38℃條件下持續(xù)對(duì)種苗處理5～6周,使病毒鈍化失活。但由于熱處理要求條件高,處理時(shí)間長(zhǎng)、苗數(shù)少,成本高,而且只能去掉部分病毒,在生產(chǎn)上難以應(yīng)用。采用熱處理結(jié)合分生組織培養(yǎng)的方法,脫毒效果很好。
具體做法:是把切取的生姜芽洗凈,在50℃高溫下熱處理5分鐘,殺死部分病毒,然后在超凈工作臺(tái)上對(duì)材料進(jìn)行消毒、解剖剝離,切取含分生組織的莖尖生長(zhǎng)點(diǎn)0.2～0.3mm,接種到(MS+BA2.0+IAA0.2)培養(yǎng)基上,放在25±2℃下暗培養(yǎng),10天后有愈傷組織長(zhǎng)出轉(zhuǎn)入光培養(yǎng),光照強(qiáng)度為1 500～2 000勒克斯,光照時(shí)間12小時(shí)/天。3周后生長(zhǎng)點(diǎn)周圍開(kāi)始分化出芽從,當(dāng)芽叢長(zhǎng)到2～3cm時(shí),將叢生芽切成單芽轉(zhuǎn)入到(MS+BA5.0+IAA0.1)繼代培養(yǎng)基中培養(yǎng),每瓶5～6株,以后每25～30天繼代1次,可繁殖出大量的脫毒試管苗,移栽前進(jìn)行壯苗生根培養(yǎng)。
2、脫毒苗鑒定
引起生姜種性退化的主要病毒為黃花葉病毒(CMV)和煙草花葉病毒(TMC),病毒檢測(cè)是生姜莖尖脫毒不可缺少的環(huán)節(jié)。
檢測(cè)生姜脫毒苗的方法主要有目測(cè)法和指示植物法:
①目測(cè)法。是利用脫毒苗和帶毒苗在形態(tài)、生長(zhǎng)勢(shì)等生物學(xué)特征上的差異來(lái)鑒別。脫毒苗生長(zhǎng)快、健壯、葉片平展,葉色濃厚,不帶皺紋。而帶毒苗生長(zhǎng)勢(shì)弱,葉片卷曲,葉色淡且出現(xiàn)花葉斑紋,褪綠斑點(diǎn)等;
②指示植物檢測(cè)法。常用曼陀羅、心葉煙、莧色藜等作指示植物,具體作法是剪取待測(cè)生姜葉片加入緩沖液按常規(guī)研磨提取出汁液,再將汁液接種到指示植物葉片上,表現(xiàn)系統(tǒng)花斑、局部枯斑和褪綠斑等癥狀者為帶毒株。
3、脫毒姜種生產(chǎn)
脫毒姜種劃分為三代,脫毒試管小苗為原原種苗,先在溫室或防蟲(chóng)網(wǎng)室的苗床中育成大苗,再移栽生產(chǎn)出脫毒生姜原種,原種栽入大田生產(chǎn)出脫毒生姜栽培種。
1).脫毒生姜原種生產(chǎn)經(jīng)過(guò)病毒鑒定的脫毒苗在移栽前需要進(jìn)行壯苗生根培養(yǎng)和煉苗馴化,將3～4cm高的小苗轉(zhuǎn)接到(MS+IAA0.2)生根培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),15天左右有白色根形成,25天后即可進(jìn)行煉苗移栽。為了防止脫毒苗感染病毒,原種生產(chǎn)應(yīng)在溫室或防蟲(chóng)網(wǎng)室內(nèi)進(jìn)行。先將煉苗基質(zhì)珍珠巖提前10天用10%甲醛液處理消毒后備用。移栽前把試管苗瓶從培養(yǎng)室取出,打開(kāi)瓶蓋在室溫下煉苗2～3天,再將試管苗取出用清水洗干凈培養(yǎng)基,假植在消毒處理過(guò)的珍珠巖基質(zhì)上(直接用營(yíng)養(yǎng)塊煉苗效果更好)。澆透水后搭上小拱棚,蓋上薄膜,注意保濕保溫,溫度控制在20～30℃,濕度90%左右,長(zhǎng)出新根后逐步揭膜煉苗,30天后把煉苗成活的脫毒苗移栽到原種生產(chǎn)的防蟲(chóng)網(wǎng)室內(nèi),加強(qiáng)管理,前期每周施營(yíng)養(yǎng)液1次,中后期逐漸減少次數(shù)。
2).脫毒種姜生產(chǎn)按當(dāng)?shù)爻Ｒ?guī)種植方法,選擇土質(zhì)肥沃、澆水條件好、無(wú)病的地塊進(jìn)行。
4、脫病毒生姜的增產(chǎn)效果
脫病毒生姜色澤鮮黃,均勻整齊,辣味濃,品質(zhì)好,產(chǎn)量高,在生產(chǎn)上去病毒苗比原品種增產(chǎn)50%以上。但脫病毒苗在生產(chǎn)上應(yīng)用3～5年后,隨著生產(chǎn)過(guò)程中感染病毒程度加重,需要更換新的脫毒苗。為了促進(jìn)和有效地保證這一技術(shù)在生產(chǎn)上的示范推廣,應(yīng)建立生姜脫毒苗的三級(jí)良種繁殖體系,逐步實(shí)現(xiàn)生姜生產(chǎn)脫毒化,從而大幅度提高生姜的產(chǎn)量和品質(zhì),產(chǎn)生更大的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。
生姜生產(chǎn)脫毒繁殖：
（1）脫毒姜種工廠化生產(chǎn)設(shè)施
①組培室。建立組織培養(yǎng)室，購(gòu)置必要的生姜組培脫毒用品。
②煉苗車間?，F(xiàn)代化煉苗車間要求車間內(nèi)溫度、光照、濕度可根據(jù)需要隨時(shí)調(diào)節(jié)，使環(huán)境條件保持在煉苗所需的最佳狀態(tài)，有利于壯苗的培育，大大提高工作效率和試管苗的成活率。
③原原種防蟲(chóng)網(wǎng)室。為確保原原種不被病毒再侵染，需建立防蟲(chóng)網(wǎng)室，種植脫毒姜試管苗，進(jìn)行脫毒姜原原種的生產(chǎn)，并進(jìn)行病毒檢測(cè)。
④原種圃和生產(chǎn)種繁育基地。原種圃和生產(chǎn)種繁育基地是兩級(jí)繁種田，必須保證無(wú)?。?/span>根莖腐爛病）、無(wú)毒［黃瓜花葉病毒（CMV）、煙草花葉病毒（TMV）］生產(chǎn)。
（2）脫毒姜種繁殖基地選擇
脫毒姜的三級(jí)繁種田選擇地處海拔高的山地較好，夏季涼爽，土壤不積水，通透性好，不適宜各種病毒的發(fā)生和傳播。若無(wú)山地條件，則應(yīng)選擇遠(yuǎn)離生姜生產(chǎn)田的地塊建立生姜繁種田。
（3）脫毒姜防病除毒途徑
脫毒姜繁種田在選用無(wú)毒、無(wú)病姜種和無(wú)病地塊情況下，進(jìn)行嚴(yán)格的水肥管理?；适褂媒?jīng)過(guò)生物發(fā)酵的羊糞和豆餅，不使用其他圈糞和土雜肥，追肥用豆餅和有機(jī)肥等。澆水用無(wú)污染水源，并用輸水管將水直接送到地頭。在蚜蟲(chóng)、姜螟、薊馬為害前，及時(shí)噴藥預(yù)防，消除病菌、病毒的傳播途徑，保證姜種的無(wú)病、無(wú)毒生產(chǎn)。
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