昨日某大學(xué)一初入免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)室同學(xué)詢抗豬IgM二抗,不想小師妹以為小福只想多賣產(chǎn)品故意欺騙她:“我要的是二抗,不是單抗!”
今天小福就給大家講講什么是一抗什么是二抗。
在百度百科,我們查到:
“一抗體就是能和非抗體性抗原(特異性抗原)特異性結(jié)合的蛋白。種類包括單克隆抗體和多克隆抗體。二抗體是能和抗體結(jié)合,即抗體的抗體,其主要作用是檢測(cè)抗體的存在,放大一抗的信號(hào)?!?/span>
在免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中,通常我們檢測(cè)某個(gè)物質(zhì)(也就是抗原),需要先加入抗-抗原的抗體(primary antibody),再加入抗-Primary Antibody的抗體(Second Antibody),通常這個(gè)Second Antibody上標(biāo)記一個(gè)酶或者熒光素什么,這些酶和熒光素是作為信號(hào)呈現(xiàn)的;因?yàn)榇蟛糠謱?shí)驗(yàn)都是這樣一個(gè)構(gòu)架模式,所以這個(gè)一抗,二抗這個(gè)名字就是這么來的,這個(gè)名稱也非常便于表述,但是在比較正規(guī)的文獻(xiàn)中大家一般看不到一抗二抗的字眼,一般會(huì)這樣表述:比如我們用western blot 檢測(cè)GAPDH,一抗會(huì)表述為:mouse anti-GAPDH monoclonal Antibody,二抗會(huì)表述為:HRP Conjugated Goat anti-mouse Igs antibody。
再理一下:通常這個(gè)所謂的二抗的“二”,是由于它是抗-抗體的抗體,所以才稱它為“二”;這個(gè)抗-抗體的抗體也可以是單抗,這個(gè)應(yīng)該可以詮釋那位同學(xué)的疑惑吧。
如果在上述的實(shí)驗(yàn)中,我們要檢測(cè)的抗原是免疫球蛋白(抗體),比如,檢測(cè)抗原human IgG1 Antibody ,實(shí)驗(yàn)構(gòu)架可能是這樣的:首先加入的抗體為Rabbit anti-(human IgG1 antibody),再次加入的抗體可能為HRP Conjugated Goat anti-(Rabbit Igs Antibody) antibody。
這里誰是二抗誰是一抗是不是有點(diǎn)暈頭?其實(shí)在有些實(shí)驗(yàn)中不一定非要指出誰是一抗誰是二抗,只需要回憶回憶猴子撈月亮的故事,后一個(gè)抗體抓住前一個(gè)抗體的“尾巴”,最后一個(gè)抗體把酶或者熒光素連起來,讓檢測(cè)信號(hào)可以高信噪比呈現(xiàn)這就完事了。
當(dāng)然,能夠在免疫實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)中一個(gè)抓另外一個(gè)“尾巴”的不僅僅是抗體,準(zhǔn)確的說應(yīng)該叫Binding Reagent,這里面大名鼎鼎的就是生物素系統(tǒng)-鏈霉親和素系統(tǒng),這個(gè)很多時(shí)候比二抗還好用,但是必須首先對(duì)一抗進(jìn)行生物素標(biāo)記。
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