【中圖分類號(hào)】 R544.1 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】 A【文章編號(hào)】1672-3873(2011)03-0303-01
【摘要】綜述了丹參有效成分的各種提取分離技術(shù),其中包括超臨界流體萃取技術(shù)、微波輔助萃取法、加壓液體萃取法、高速逆流色譜法和真空液相層析法等,并分別對(duì)其優(yōu)缺點(diǎn)進(jìn)行分析,為丹參藥理學(xué)活性物質(zhì)基礎(chǔ)的研究提供參考。
【關(guān)鍵詞】丹參 提取 分離 技術(shù)
丹參為唇形科植物丹參Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根及根莖,始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,被列為上品,歷代本草均有收載。其味苦、性微寒,歸心、肝二經(jīng)。具祛瘀止痛、活血通經(jīng)、清心除煩之功效,是一種臨床應(yīng)用廣泛的中藥。 隨著人類疾病譜的變化,丹參作為能夠預(yù)防和治療人類面臨的幾大危險(xiǎn)疾病的植物藥之一,它的應(yīng)用將會(huì)更加廣泛。
1、丹參有效成分的提取分離
丹參有效成分包括脂溶性成分和水溶性成分,因此提取分離工藝分為脂溶性成分二萜醌類的提取分離和水溶性成分酚酸類的提取分離。近年來(lái),對(duì)于丹參有效成分提取分離方面的研究較多,主要涉及到:總有效成分的提取分離、二萜醌類的提取分離和酚酸類的提取分離。筆者分析了各種提取分離法的優(yōu)缺點(diǎn),為丹參有效成分的提取分離及丹參藥理學(xué)活性物質(zhì)基礎(chǔ)的研究提供參考。
1.1總有效成分的提取分離丹參的有效成分復(fù)雜,總有效成分的提取率較低。主要的提取方法有醇提法、超聲法、CO2超臨界萃取法(SFE)。梯度滲漉法具有濃度梯度大,浸出效果好,溶劑用量少,適合于有效成分含量低的中藥材提取等優(yōu)點(diǎn)。 這是由于傳統(tǒng)方法多數(shù)都有加熱過(guò)程或產(chǎn)熱過(guò)程,而超臨界萃取法受熱小,并且同時(shí)具有液體溶劑的溶解能力和氣體的傳遞特性,萃取后溶質(zhì)和溶劑易于分離等優(yōu)點(diǎn),特別適合于熱敏性、易氧化物質(zhì)的分離或提純。而丹參酮ⅡA對(duì)光不穩(wěn)定,丹酚酸B受熱易分解,這就是傳統(tǒng)提取方法的提取率較超臨界萃取法提取率低的原因。
1.2二萜醌類成分的提取分離二萜醌類,又稱丹參酮,主要包括丹參酮ⅡA、異丹參酮、隱丹參酮和二氫丹參酮等。丹參酮在臨床上的應(yīng)用較早,對(duì)其提取分離的研究也較為深入。其提取方法主要有醇提法,超聲提取法,CO2超臨界流體萃取法,微波輔助萃取法(MAE),加壓液體萃取法(PLE);分離的方法有高速逆流色譜法(HSCCC),柱層析和真空液相層析法(VLC)。
趙小亮等歸納了丹參有效成分丹參酮的各種傳統(tǒng)提取方法,比較了傳統(tǒng)提取方法與CO2超臨界流體萃取法(SFE)各自的優(yōu)缺點(diǎn),得出SFE法提取率較高,可用于丹參酮的提取。MAE法是利用微波能所產(chǎn)生的破壁效應(yīng),使植物細(xì)胞內(nèi)的活性成分較完全的釋放出來(lái),然后利用固相萃取法,也稱液―固萃取法,將保留在吸附劑上的樣品根據(jù)選擇性吸附與選擇性洗脫的過(guò)程差異,先用適當(dāng)溶劑系統(tǒng)洗去雜質(zhì),然后再在一定條件下選用不同極性的溶劑,將目標(biāo)成分洗脫下來(lái),達(dá)到分離凈化和富集的目的。 為下一步的含量測(cè)定奠定了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
高速逆流色譜法(HSCCC)利用兩相溶劑體系在高速旋轉(zhuǎn)的螺旋管內(nèi)建立起一種特殊的單向性流體動(dòng)力學(xué)平衡,是一種連續(xù)高效的液―液分配色譜分離技術(shù),它的突出優(yōu)點(diǎn)是適用范圍廣、操作靈活、高效、快速、制備量大、費(fèi)用低等。Tian等利用多維逆流色譜法的高分離效率,對(duì)丹參中4種丹參酮(丹參酮IIA、丹參酮I、隱丹參酮、二氫丹參酮I)進(jìn)行了分離,每種成分的純度都超過(guò)95%。
王慶偉等根據(jù)柱層析和真空液相層析法(VLC)從丹參中分離丹參酮,得到了丹參脂溶性主要有效成分丹參酮I、丹參酮ⅡA及隱丹參酮。VLC法是國(guó)外有機(jī)化學(xué)實(shí)驗(yàn)室較為流行的一種分離方法,其原理相當(dāng)于薄層層析的多次展開(kāi),但該方法與薄層層析法相比具有操作簡(jiǎn)便、分離速度快、化合物純度高、節(jié)約試劑和處理量較大等優(yōu)點(diǎn),值得推廣使用。
在4種丹參酮中,以丹參酮IIA臨床應(yīng)用較多,因此,對(duì)其提取分離的研究也頗多。除了上述研究丹參酮的方法外,亞臨界水提取法被用來(lái)提取丹參中的丹參酮IIA。亞臨界水提取法利用升高溫度和壓力,水的極性(介電常數(shù))降低(ε
1.3酚酸類成分的提取分離由于水溶性成分在水中有較大的溶解度,因此,對(duì)于丹參水溶性成分的提取主要以水提取為主,最近,有關(guān)微波應(yīng)用于丹參水溶性有效成分的提取也有報(bào)道。主要的分離方法有大孔樹脂吸附法,HSCCC法。
在丹參水溶性成分中,研究丹酚酸B的報(bào)道較多。倪力軍等開(kāi)發(fā)丹參中提取高純度丹酚酸B的新工藝,采用水提―殼聚糖絮凝―過(guò)濾―濃縮―醇沉―萃取工藝,本工藝便于工業(yè)化實(shí)施。孫金蘭等系統(tǒng)綜述了丹參中丹酚酸B的提取、純化方法,并對(duì)超臨界流體萃取、超聲提取法與傳統(tǒng)提取技術(shù)進(jìn)行比較和論述,結(jié)果是超臨界法萃取法的提取成分最多,其萃取效率也高于回流提取法和超聲提取法的萃取效率。
劉敏彥等采用高效液相色譜法比較了煎煮、超聲、索氏提取3種不同提取方法中丹酚酸B、丹參素、原兒茶醛的含量,結(jié)果超聲提取丹酚酸B含量最高,索氏提取丹參素、原兒茶醛含量最高。
關(guān)丹等在研究水提法提取丹參中水溶性成分的基礎(chǔ)上,進(jìn)行了生物酶法提取丹參水溶性成分的研究。生物酶法是選用適當(dāng)?shù)拿?,通過(guò)反應(yīng)較溫和地將植物組織分解,加速有效成分的釋放,并可將雜質(zhì)如蛋白質(zhì)、果膠、淀粉等分解,再選用合適的提取劑提取。結(jié)果表明生物酶法對(duì)丹參素的提取率比水提法提取率有極大提高。
由于HSCCC法具有簡(jiǎn)便、快速等優(yōu)點(diǎn),故應(yīng)用HSCCC法分離丹參中丹酚酸B的報(bào)道較多, 陳月娥等應(yīng)用高速逆流色譜分離丹酚酸B,可以從1g丹參粗提物中分離得到了35 mg丹酚酸B。Wang等用pH區(qū)帶逆流色譜,可以得到94.1%的丹酚酸B。Li等用HSCCC法從粗提取液中分離得到98%的丹酚酸B,使純度大大提高。
2、結(jié)語(yǔ)
目前,丹參有效成分的提取分離存在提取效率不高,分離純化困難,有效成分純度低等問(wèn)題。尤其丹參酮ⅡA對(duì)光不穩(wěn)定和丹酚酸B受熱分解等因素,進(jìn)一步限制了一些提取分離方法的使用。隨著微波萃取、生物酶、半仿生提取、CO2超臨界流體萃取、大孔樹脂吸附、超濾、分子蒸餾、高速逆流色譜等新技術(shù)在中草藥有效成分的提取分離純化中的推廣應(yīng)用,高純度有效成分的獲取將成為可能。因此,丹參有效成分提取分離的研究有待進(jìn)一步開(kāi)展。
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