近日，暨南大學(xué)中藥生物技術(shù)研究所科研團(tuán)隊(duì)成功從毛蚶中發(fā)現(xiàn)了兩種新型的抗氧化肽。這兩種抗氧化肽在延長(zhǎng)線(xiàn)蟲(chóng)壽命和周期方面表現(xiàn)突出，能夠增強(qiáng)線(xiàn)蟲(chóng)對(duì)抗壓力的抵抗力，減少線(xiàn)蟲(chóng)脂肪、ROS和脂褐素的積聚，并且能夠激活線(xiàn)蟲(chóng)胰島素/IGF1（IIS）信號(hào)通路。
蛤類(lèi)作為市場(chǎng)上較為常見(jiàn)的無(wú)脊椎生物，很早之前就表現(xiàn)出其在美容肽及各類(lèi)激素肽中的較好潛力。此次暨南大學(xué)研究團(tuán)隊(duì)再次從中發(fā)現(xiàn)兩種新型的抗氧化肽D2-G1S-1（VENAACTTNEECCEKK）和G2-G1S -2（VEGGAACTTGGEEGCCEKK）。
從市場(chǎng)買(mǎi)回來(lái)的毛蚶，經(jīng)鑒定之后把內(nèi)臟腫塊從蛛網(wǎng)膜下切開(kāi)，經(jīng)蒸餾水、超聲波等多道工序清洗過(guò)后，以30：3的磷酸鹽溶液用直探頭和連續(xù)脈沖持續(xù)40分鐘。然后將提取物在10000 rpm下離心30分鐘。上清液用100%飽和的固體硫酸銨沉淀。最后，使用透析管將上清液用蒸餾水透析并凍干。
將上清液部分上樣到DEAE Sepharose Fast Flow陰離子交換柱上，并用NaCl（0、0.1、0.3和2 M）逐步洗脫，得到四個(gè)峰，分別為D1，D2，D3和D4（圖1A）。用0.1μm NaCl溶液洗脫的組分D2用Sephadex G-25柱進(jìn)一步純化，然后用H2O洗脫。如補(bǔ)充數(shù)據(jù)圖1B所示，分離出三個(gè)組分，并連續(xù)命名為D2-G1至D2-G3。采用反相高效液相色譜法進(jìn)一步純化D2-G1組分，梯度洗脫。D2-G1S的保留時(shí)間為28.490?min（圖1C）。通過(guò)HPLC檢測(cè)D2-G1S的純度為95%（圖1D）。
圖1
本研究采用DEAE-Sepharose快流陰離子交換柱、sephadexg-25柱和RP-HPLC，從亞甲藻硫酸銨鹽析廢液（上清液）中分離純化了單體肽D2-G1S。通過(guò)從頭肽序列測(cè)定，從酶解D2-G1S中鑒定出兩種新肽，即D2-G1S-1（Venaacttneeckk）和G2-G1S-2（VEGGAACTTGGEEGCCEKK）。
兩種多肽均表現(xiàn)出較強(qiáng)的DPPH和ABTS +清除自由基的活性和鐵還原抗氧化能力。D2-G1S-1和G2-G1S-2對(duì)熱處理和pH處理也保持穩(wěn)定，但也保留了它們的抗氧化活性。為了揭示這些特征如何影響活體動(dòng)物的衰老機(jī)制，科研人員發(fā)現(xiàn)D2-G1S-1和D2-G1S-2顯著延長(zhǎng)了線(xiàn)蟲(chóng)成蟲(chóng)的壽命和抗氧化能力，減少了線(xiàn)蟲(chóng)體內(nèi)脂肪、ROS和脂褐素的積累。重要的是，這些肽并沒(méi)有減少線(xiàn)蟲(chóng)彎曲身體的頻率或咽泵，這表明它們的抗衰老作用并不是以減少生物體生長(zhǎng)為代價(jià)的。通過(guò)RNA測(cè)序和qRT-PCR分析，深入了解兩種多肽的抗衰老機(jī)制，發(fā)現(xiàn)D2-G1S-1和D2-G1S-2能夠通過(guò)調(diào)節(jié)胰島素/IGF-1信號(hào)通路，顯著延長(zhǎng)線(xiàn)蟲(chóng)的壽命和健康壽命。
綜合來(lái)看，由于其抗氧化性、耐熱性、pH值和延長(zhǎng)線(xiàn)蟲(chóng)健康壽命的潛力，D2-G1S-1和D2-G1S-2在作為功能性化妝品添加劑方面有著比較好的應(yīng)用前景。
引用文獻(xiàn)：[1].Two novel antioxidant peptides derived from Arca subcrenata against oxidative stress and extend lifespan in Caenorhabditis elegans
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