分光光度法問答
一．分光光度法是環(huán)境監(jiān)測中常用的方法，分光光度法的主要特點：
(1) 靈敏度高；
(2) 準(zhǔn)確度高：
(3) 適用范圍廣；
(4) 操作簡便、快速：
(5) 價格低廉。
二．校正分光光度計波長的方法：
校正波長一般使用分光光度計光源中的穩(wěn)定線光譜或有穩(wěn)定亮線的外部光源，把光束導(dǎo)入光路進行校正，或者測定已知光譜樣品的光譜，與標(biāo)準(zhǔn)光譜對照進行校正。
三．分光光度法測定樣品時，選用比色皿應(yīng)該考慮的主要因素：
(1) 測定波長。比色液吸收波長在370nm以上時可選用玻璃或石英比色皿，在370nm以下時必須使用石英比色皿；
(2) 光程。比色皿有不同光程長度，通常多用10.0mm的比色皿，選擇比色皿的光程長度應(yīng)視所測溶液的吸光度而定，以使其吸光度在0.1～0.7之間為宜。
四．如何檢查分光光度計的靈敏度：
靈敏度是反映儀器測量性能的重要指標(biāo)，檢查方法為：配制0.001％重鉻酸鉀溶液，用1cm比色皿裝入蒸餾水作參比，于440nm處測得的吸光度應(yīng)大于0.010。若示值＜0.010，可適當(dāng)增加靈敏度的擋數(shù)，如仍不能達到該值，應(yīng)檢查或更換光電管。
五．在光度分析中，消除共存離子的干擾的方法：
(1) 盡可能采用選擇性高、靈敏度也高的特效試劑；
(2) 控制酸度，使干擾離子不產(chǎn)生顯色反應(yīng)；
(3) 加入掩蔽劑，使干擾離子被絡(luò)合而不發(fā)生干擾，而待測離子不與掩蔽劑反應(yīng)；
(4) 加入氧化劑或還原劑，改變干擾離子的價態(tài)以消除干擾；
(5) 選擇適當(dāng)?shù)牟ㄩL以消除干擾：
(6) 萃取法消除于擾；
(7) 其他能將被測組分與雜質(zhì)分離的步驟，如離子交換、蒸餾等；
(8) 利用參比溶液消除顯色劑和某些有色共存離子干擾；
(9) 利用校正系數(shù)從測定結(jié)果中扣除干擾離子影響。
六．用分光光度法測定樣品時，什么情況下可用溶劑作空白溶液?
當(dāng)溶液中的有色物質(zhì)僅為待測成分與顯色劑反應(yīng)生成，可以用溶劑作空白溶液，簡稱溶劑空白。
七．一臺分光光度計的校正應(yīng)包括哪4個部分?
波長校正：吸光度校正；雜散光校正；比色皿校正。
八．在光度分析中酸度對顯色反應(yīng)主要有哪些影響?
(1) 對顯色劑本身的影響；
(2) 對溶液中各元素存在狀態(tài)的影響；
(3) 對顯色反應(yīng)的影響。
九．簡述朗伯-比爾定律A=kcL的基本內(nèi)容，并說明式中各符號的含義：
朗伯—比爾定律是比色分析的理論基礎(chǔ)，它可綜合為光的吸收定律，即當(dāng)一束單色光通過均勻溶液時，溶液的吸光度與溶液的濃度和液層厚度的乘積成正比。
式中：A—吸光度； k—吸光系數(shù)； C—待測物濃度； L—液層厚度。
十．簡述在朗伯-比爾定律中，吸光系數(shù)與摩爾吸光系數(shù)的區(qū)別。
在朗伯-比爾定律A=kcL中，K是比例常數(shù)，它與入射光的波長、溶液的性質(zhì)有關(guān)。如果有色物質(zhì)溶液的濃度c用g／L表示，液層厚度以cm表示，比例常數(shù)眾稱為吸光系數(shù)。如果濃度c用mol／L表示，液層厚度以cm表示，則比例常數(shù)k稱為摩爾吸光系數(shù)。摩爾吸光系數(shù)的單位為L／(mol·cm) ，它表示物質(zhì)的濃度為1mol／L、液層厚度為1cm時溶液的吸光度。
十一．在光度分析中如何用鐠釹濾光片對光度計的波長進行校正。
用特制的鐠釹濾光片 (預(yù)先在精密度較高的儀器上進行校正過) 校正儀器波長時，通常用573nm和586nm的雙峰譜線校正。
十二．在光度分析中如何選擇顯色劑。
(1) 顯色劑的靈敏度要高；
(2) 顯色劑的選擇性要好；
(3) 所形成的有色化合物應(yīng)足夠穩(wěn)定，而且組成恒定，有確定的組成比；
(4) 所形成的有色化合物與顯色劑之間的差別要大；
(5) 其他因素如顯色劑的溶解度、穩(wěn)定性、價格等。
十三．在光度分析中共存離子的干擾主要的情況：
(1) 共存離子本身有顏色影響測定；
(2) 共存離子與顯色劑生成有色化合物，同待測組分的有色化合物的顏色混在一起；
(3) 共存離子與待測組分生成絡(luò)合物降低待測組分的濃度而干擾測定；
(4) 強氧化劑和強還原劑存在時因破壞顯色劑而影響測定。
十四．在光度分析中引起偏離光吸收定律的原因：
(1) 由于入射光單色性差而引起偏離：
(2) 由于溶液中的化學(xué)變化而引起偏離 (待測物質(zhì)離解、締合) ；
(3) 由于介質(zhì)的不均勻性而引起偏離。
