大家好，今天我們介紹這篇文章：MicroRNA-143 Activation Regulates Smooth Muscle and Endothelial Cell Crosstalk in Pulmonary Arterial Hypertension.Circ Res（IF 11.0）. 2015 Oct 23;117(10):870-83. （全文下載鏈接：http://pan.baidu.com/s/1nvkw6ed 密碼：ytw9），并在文后總結(jié)部分給大家提升文章檔次的三個錦囊。
首先我們看文章的機制圖：
在PASMC（肺動脈平滑肌細胞）中，肺動脈高壓發(fā)生相關(guān)信號通路通過激活miR-143/145啟動子活性調(diào)節(jié)miR-143/145的表達。 在血管重構(gòu)過程準哦功能，MiR-143-3p作為旁分泌信號來介導細胞運動、調(diào)控凋亡。在PAH（肺動脈高壓）進展過程中，PASMC分泌包含miR-143-3p的外泌體，并被轉(zhuǎn)運到PAEC（肺動脈內(nèi)皮細胞）誘導細胞的運動和血管生成。
這篇文章的內(nèi)容包括三部分：
1. MiR-143在PAH動物模型、病人樣本中高表達，而且miR-143/145的表達激活是由于其啟動子上游區(qū)域含PAH相關(guān)信號通路中轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點所導致；
3. MiR-143通過PASMC分泌的外泌體傳遞到PAEC，并調(diào)節(jié)PAEC的運動和血管形成能力。
我們先看一下PASMC與PAEC的共培養(yǎng)體系（與Transwell非常像）：
作者分別用共培養(yǎng)體系和來源于PASMC的培養(yǎng)基，來評估含MiR-143的外泌體從PASMC分泌到PAEC，并對PAEC運動能力的影響。
然后評估PASMC來源的外泌體中miR143對PAEC運動和血管形成能力的影響。
最后總結(jié)一下，這篇文章有幾個關(guān)鍵詞：microRNA；外泌體；肺高血壓；轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)，這篇文章之所以能發(fā)11分，我們有哪些亮點可供參考，以幫我們提升文章的檔次：
不走下游走上游：作者選microRNA143/145簇（cluster）作為關(guān)鍵分子，對microRNA的經(jīng)典套路來說，一般會從下游著手，比如預測靶基因，然后在PASMC中驗證microRNA143/145在PASMC中的功能（運動、凋亡），然后通過熒光素酶報告基因?qū)嶒炞C明microRNA143/145對靶基因的調(diào)控；而作者呢，則反其道而行之，研究microRNA上游的因子對表達的調(diào)控，此為亮點一；當然，對microRNA啟動子和轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點的分析驗證、以及對甲基化等其他可能調(diào)控microRNA表達因素的排除也是我們學習的地方；
引入熱點：外泌體，在通過PASMC驗證了microRNA143的功能后，作者進一步研究了外泌體中的microRNA143在PASMC與PAEC細胞通訊中的作用，在對外泌體進行大小、電鏡、Marker等方式進行鑒定后，通過共培養(yǎng)體系、條件性培養(yǎng)基兩方面驗證外泌體在PASMC與PAEC細胞通訊中的作用，實驗設計和方法都很經(jīng)典，所以做microRNA研究的小伙伴，除了常規(guī)實驗外，可以考慮外泌體作為加分點哦！
體內(nèi)實驗表型逆轉(zhuǎn)：考慮到動物實驗的復雜性，體外細胞實驗的表型有一定概率在動物實驗難以重復，不可否認，作者通過體內(nèi)動物模型實驗對microRNA143的進行了干預，并逆轉(zhuǎn)了PH的表型，這是本文加分的第三點。
